戴奥辛细胞检测系统之建立.PDFVIP

生物科學 第四十七卷 第一期 1 - 18 頁（2004 ） 戴奧辛細胞檢測系統之建立 1 2 2 1 1 1* 黃怡瑋 、李偉山 、張簡國平 、林紀佑 、高禎陽 、李心予 1國立台灣大學生命科學系暨動物學研究所 2正修科技大學化學工程學系暨化學工程研究所 【摘要】戴奧辛（dioxin ）是一種苯環類化合物之統稱，也是一種著名的環境毒物，由於 具有高度脂溶性，故常經由食物鏈途徑在生物體內積存，對其生理系統會造成很大的影 響，甚至是細胞組織的病變。目前國內外針對戴奧辛的檢測方法仍是以化學分析方法為主 流，費時且耗費昂貴，隨著人們對戴奧辛在生物體內致毒機制了解的日益增，以生物反應 為基礎的生物檢測方法（bioassays ）逐漸受到重視。目前戴奧辛之生物檢測方法包括了 in vivo biomarkers, in vivo bioassays, 和 in vitro bioassays 三大類。然而 In vitro bioassays 系統較能真實反應戴奧辛對於生物體的毒害程度，且在時間及金錢上佔有相對 的優勢。有鑒於戴奧辛生物檢測對戴奧辛生物危害的直接意義，本研究期望可以利用細胞 反應來辨識戴奧辛環境污染物，因此我們以 CALUX (chemical-activated luciferase expression) assay 為基礎，建立含有 dioxin response element 和 luciferase gene 的表達 質體，分別送入不同的細胞株中，結果發現冷光的表現和戴奧辛含量有明顯正向關係，希 望藉由此冷光的定量做出一組標準曲線圖，使其更進一步成為比現今檢測方法更為省時有 效的環境污染物檢測工具。 【關鍵詞】環境污染、戴奧辛、生物檢測 背景及目的 由於文明過度的開發，許多有形無形的污染因子一再的侵襲生活在文明世界的人類社 會，在醫學研究方面不斷投注資金人力研究疾病治療科學的同時，了解基礎引起疾病的根 源才能夠防患於未然。科技的進步，伴隨產生了更多對生物體的危害增加的環境污染因 子。在預防重於治療的前提之下，醫學研究方面開始投注目光在研究環境污染因子對生物 體所造成的影響。 以台灣而言，隨著經濟以及人口的發展，垃圾的質與量也與日俱增，在這個地小人稠 的島嶼，焚化是最適合的垃圾減量方式，也是台灣目前的主要處理方式，可是焚燒垃圾後 接至而來的就是污染問題，尤其是焚化廢棄物產生的灰渣中所含的戴奧辛類毒性物質，對 整個環境來說都是一個潛在的危機，因此如何能在最短的時間裡用最有效的方法來檢測出 此環境污染因子，變成一件刻不容緩的事。 _____________________________________________________________________ * 通訊作者，106 臺北市羅斯福路四段 1 號，電話：（02 ，傳真：（02 Email： hsinyu@ntu.edu.tw 2 生物科學 第四十七卷 第一期 1 - 18 頁（2004 ） 戴奧辛之簡介 戴奧辛（dioxin ）是兩個氧原子連結一對苯環類化合物之統稱，屬於 halogenated aromatic hydrocarbons （HAHs ）的其中一類，也是一種著名的環境毒物。它包括了 75 種多氯二聯苯戴奧辛（polychlorinated dibenzo-p-dioxins ，簡稱PCDDs ）及 135 種多氯 二聯苯喃（polychlorinated dibenzofurans ，簡稱PCDFs ），約210 種不同的化合物（ Hu et al., 1999 ）。在眾多的戴奧辛中，2,3,7,8 – tetrachlorodibenzo – p - dioxin （TCDD ） 的 毒性是最強的（Van den Berg et al., 1994 ）。TCDD 最初被發現為製造殺蟲劑過程中的副 產品（Hay et al., 1978 ），後來，科學家知道在焚化含有大量氯分子垃圾的過程中會釋出 大量的戴奧辛，由於其結構穩定不易分解，因而在各種環境媒介如空氣、土壤、水、