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2012版输血科血库实验室标准操作规程
医院logo xxx医院血库 编号: XK-SOP 版次:1 实验SOP文件 生效日期:2012-8-1 第1页 共1页 实验SOP文件目录
编号
程序文件名称
页码
XK-SOP-01
ABO血型正定型
1-3
XK-SOP-02
ABO血型反定型
4-6
XK-SOP-03
RH D血型鉴定
7-9
XK-SOP-04
RH血型定型
10-11
XK-SOP-05
聚凝胺试验
12-14
XK-SOP-06
盐水配血试验
15-16
XK-SOP-07
微柱凝胶卡式配血试验
17-19
XK-SOP-08
卡式血型鉴定
20-21
XK-SOP-09
卡式抗体筛查试验
22-23
XK-SOP-10
抗体筛查试验(聚凝胺,抗人球蛋白法)
24-26
XK-SOP-11
ABO血型定型试剂质量控制(标准血清)
27-28
XK-SOP-12
ABO血型反定型用红细胞质量控制(国产试剂)
29-29
XK-SOP-13
配血、血型试验标记规定
30-33
XK-SOP-14
标准A、B红细胞制备
医院logo xxx医院血库 编号:XK-SOP 版次:1 实验SOP文件 生效日期:2012-8-1 第1页 共3页 ABO血型正定型
实验目的
用盐水介质法进行ABO血型系统正定型的鉴定。
实验原理
红细胞作为一种颗粒性抗原,在液体介质中和电解质的参与下,可直接与相应抗体结合,出现肉眼可见的凝集现象,用已知IgM类特异性标准抗血清与被检红细胞在盐水介质中反应,若出现凝集现象,表明被检红细胞膜上有与血型抗体所对应的抗原,从而判断和鉴定被检者的ABO血型。
标本采集
3.1、采血管:应采用EDTA抗凝的采血管采集血标本,标本中不可有血凝块。
3.2、标本接收:接收标本时应该对标本标签信息与申请单信息是否相符,填写是否完整;所采用血管是否正确;标本是否符合要求(无溶血,无乳糜,无杂物)。
3.3、标本处理:接收标本后尽快分离血浆或血清立即进行检测,如暂时不用可放1-10℃范围的标本冰箱保存3天。
4、试剂及被检细胞
4.1、抗A、抗B标准血清。
4.2、35%-45%被检红细胞。
4.3、2%-4%被检红细胞。
5、设备
5.1、血型血清学试验离心机:久保田公司、Diana公司产品。
5.2、eppendorf多功能离心机。
5.3、振荡器。
6、实验操作
6.1、玻片法
6.1.1、取一张破片,分区标注-A、-B及被检者编号、血型。
6.1.2、载玻片上-A、-B区域分别加入1滴(-50微升)相应-A、-B标准血清及1滴(-50微升)35%-45%被检红细胞。
6.1.3、摇动玻片放置约2分钟。
6.1.4、观察并记录结果。
6.2、试管法 医院logo xxx医院血库 编号:XK-SOP 版次:1 实验SOP文件 生效日期:2012-8-1 第2页 共3页
6.2.1、取2只试管,分区标注-A、-B及被检者编号、血型。
6.2.2、在-A、-B试管内分别加入1滴(-50微升)相应-A、-B标准血清及1滴(-50微升)2%-4%被检红细胞。
6.2.3、离心,1000rcf/15s。
6.2.4、肉眼观察并记录结果。
6.3、微板法
6.3.1、取一准备完毕的微板,取合适的两孔分别标注-A、-B及被检者编号、血型。
6.3.2、在-A、-B区域分别加入1滴(-50微升)相应-A、-B标准血清及1滴(-50微升)2%-4%被检红细胞。
6.3.3、轻摇微孔板,混匀孔中液体。
6.3.4、400g离心30s。
6.3.5、用震荡仪震荡微量板,震动能使阳性反应出现凝集细胞扣,而若是阴性反应细胞扣则很快消除。
6.3.6、判读并记录结果。
7、结果判定
正定型
反定型
血型
抗A
抗B
A1细胞
B细胞
O细胞
+
–
–
+
–
A
–
+
+
–
–
B
–
–
+
+
–
O
+
+
–
–
–
AB
-A侧凝集,-B侧不凝集,为A型。
-A侧不凝集、 -B侧凝集,为B型。
-A、-B侧均凝集,为AB型。
-A、-B侧均不凝集,为O型。
8、临床意义
8.1、用于临床输血:严重贫血,各种急慢性失血的患者,以及手术前需要备的病人,都必须提前检查血型和交叉配血。因血型不符的输血会造成严重的溶血性输血反应,所以必须要坚持同型输血。
8.2、新生儿溶血症:当母亲与胎儿血型不合时,可能会引起胎儿或新生儿的免疫溶血性疾病,多发生于O型母亲孕育A型或B型胎儿时。 医院logo xxx医院血库 编号:XK-SOP 版次:1 实验SOP文件 生
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