abo血型鉴定人血涂片的观察2009.pptVIP

ABO血型鉴定 实验原理 根据凝集原与凝集素之间的免疫反应 关系，用已知的凝集素等（抗体）鉴 定被检查者红细胞上的未知的凝集原 （抗原）。 实验原理 若将血型不相容的两个人的血滴放在玻片上混 合，其中的红细胞即聚集成簇，这种相容称为 凝集 (agglutination )。红细胞的凝集有时还伴 有溶血。造成红细胞凝集的机制是抗原-抗体反 应。凝集原的特异性完全取决于镶嵌入红细胞 膜上的一些特异糖蛋白，在凝集反应中糖蛋白 起着抗原的作用，因而称它们为凝集原。能与 红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体则称为 凝集素(agglutinin)。凝集素是由γ-球蛋白构成 的，它们溶解在血浆中。发生抗原-抗体反应时， 由于每个抗体上具有10个左右与抗原结合的部 位，抗体在若干个带有相应抗原的红细胞之间 形成桥梁，因而使它们聚集成簇。 实验原理 细胞的染色即有物理的吸附作用又有化学的亲和作用. 各种细胞和细胞的各种成份化学性质不同对各种染色料的亲和力也不一样. 因此用染色液染色后在同一血片上可以看到各种不同的色彩, 例如血红蛋白嗜酸性颗粒为碱性蛋白质与酸性染料伊红结合染粉红色称为酸性物质, 细胞核蛋白和淋巴细胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染蓝色或紫色称为嗜碱性物质, 中性颗粒成等电状态与伊红和美蓝均可结合,染紫红色称中性物质. 瑞氏染色法原理 瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料。 美蓝(又名亚甲蓝mehylene blue)为四甲基硫堇染料,有对醌型和邻醌型两种结构,通常为氯盐,即氯化美蓝，美蓝容易氧化为一,二,三甲基硫堇等次级染料(即天青)市售美蓝中部份已被氧化为天青. 伊红(又名曙红cosin)通常为钠盐即伊红化钠。美蓝和伊红水溶液混合后产生一种憎液性胶体伊红化美蓝中性沉淀, 即瑞氏染料。瑞氏染料溶于甲醇后, 又重新解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。 实验材料、试剂 实验材料：医用采血针、酒精棉球、载玻片、 血推片、消毒采血管 实验试剂：抗B血清、抗A血清、 生理盐水、蒸馏水 仪器设备：光学显微镜 实验步骤 1、 取一块清洁玻片，用记号笔标上(A、B)记号。 2、在A侧加一滴抗A标准血清，在B侧加一滴抗B 标准血清。 3、以穿刺法自左手无名指指尖取血，在玻片的 每侧各放入一小滴血，用牙签搅拌，使每侧 抗血清和血液混和。每边用一支牙签，切勿 混用。 4、静置室温下10-15min后，观察有无凝集现象， 并据此判断血型。 实验步骤 如果两侧均不凝集，则为0型； 只有A侧发生凝集反应，则为A型； 只有B侧发生凝集反应，则为B型； A,B两侧均凝集，则为AB型。 思考题 1：如何区别血液的凝集和凝固？其机理有何差别？ 2：根据你的血型，判断你能接受何种血型并且能够给何种血型供血？ 3：O型血人又被称为“万能供血者”，试根据ABO血型分型做出你对这一说法的理解。 4：试根据父母的血型，写出后代的可能血型： 父亲 A+ B- O- AB+ 母亲 O- A- AB+ B- 子女 人血涂片的观察 血液 组成 血细胞 红细胞 白细胞 血小板 血液 血浆 (细胞间质) 水 血浆蛋白，糖，维生素，激素，代谢产物及无机盐等 1、血细胞 1）红细胞 ( erythrocyte, red blood cell, RBC ) 形态：胞体双凹圆盘状，中央较薄，周缘较厚；成熟红细胞无核，无细胞器，胞质内充满血红蛋白 （hemoglobin) 特点：有一定的弹性和可塑性；细胞膜是一种半透膜：细胞膜具有特殊的 ABO 血型抗原 正常值 RBC 男性 400万～ 500 万/μl 女性 350万～ 450万/μl Hb 男性 12 ～ 15 g/100ml 女性 10.5~13.5g/100ml 临床上，若RBC 300万/μ l 和Hb 10 g/100ml，即为贫血。 红细胞 Wright 或 Giemsa染色 红细胞 扫描电镜 2）白细