——实时荧光定量试剂盒说明书.PDF

Power qPCR PreMix （SYBR Green ）User Manual ——实时荧光定量试剂盒说明书 I. 试剂盒组成 GK8020-200 GK8020-600 GK8020-1000 产品组成 20ul X 200 reactions 20ul X 600 reactions 20ul X 1000 reactions 2 X Power qPCR PreMix 2X 1 ml 6X 1 ml 10X 1 ml （with SYBR Green I ） 50 ×ROX Reference Dye 1 X 80 ul 3X 80 ul 5 X 80 ul II. 储存条件 收到试剂盒后，请置于-20℃保存。本产品于-20℃条件下至少可稳定保存一年。使用时，将2 X Power qPCR PreMix （SYBR Green）和 50 × ROX Reference Dye置于冰上溶解，轻轻混匀并短暂离心后使用。为保证 使用效果，试剂盒保存于-20℃，避免长期储存于4℃或室温下。 III. 产品介绍与特点 以SYBR Green荧光染料嵌合法为基础的Power qPCR PreMix可快速有效的进行实时荧光定量。试剂组份 包含高保真热启动DNA聚合酶、优化的反应缓冲液和高质量dNTPs，即使用于低拷贝基因，同样可以特异、 灵敏的进行扩增。Power qPCR PreMix提供了一种通用qPCR反应条件，减少实验设计时间，适用于几乎所有 引物和大多数qPCR仪器类型。 产品特点 1. 适用于Real Time PCR反应的2 X PreMix，预先混有SYBR Green I，反应体系经过优化，PCR配制时， 只需加入模板、引物和灭菌蒸馏水，操作方便。 2. 2 X PreMix中含有的高保真热启动DNA聚合酶为采用特殊修饰的金牌Taq酶，能有效避免非特异性扩增 及引物二聚体产生。 3. 产品扩增效率高，能在宽广的范围内进行精确定量。产品检测的灵敏度较高，即使检测低拷贝基因也可 以得到较好结果。 IV. 实验前准备 请注意： · 开始实验前请仔细阅读产品使用手册。 · 在处理化学制品前，请穿戴实验服、一次性手套和护目镜。 · 为保证使用效果，试剂盒保存于–20 °C，避免储存或放置于4°C 或室温条件下。 · 轻柔颠倒离心管数次以使试剂混合均匀，避免产生泡沫，短暂离心后备用。 · 使用PCR级纯水配制qPCR反应混合液，整个配制过程保持在冰上进行。 · 按照实验流程进行操作，避免核酸污染和非特异性扩增。 V. 实验步骤 1. 将2 X Power qPCR PreMix and 50×ROX Reference Dye置于冰上融解，融解后轻柔混匀，短暂离心（使 管壁上的溶液聚集到管底部）后置于冰上保存。 2. 按照下表准备PCR反应液，确保整个准备过程在冰上进行。 反应液组份 体积 终浓度 2 X Power qPCR PreMix 10 µl 1× 正向引物 (2 µM) 2 µl 0.2 µM 反向引物 (2 µM) 2 µl 0.2 µM 模板 2 µl 50×Rox Reference Dye 0.4 µl 1× 双蒸水 3.6 µl Final volume 20 µl 注意事项： · 确保2 X Power qPCR PreMix体积占qP