Apollon蛋白在胃癌组织中的表达及意义.docVIP

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Apollon蛋白在胃癌组织中的表达及意义

Apollon蛋白在胃癌组织中的表达及意义   作者:刘奇,张云新,魏振彤,冯野,王雪峰,赵吉  作者单位:吉林大学第三临床医学院,吉林 长春   【摘要】目的 研究Apollon基因在胃癌组织的表达及意义。方法 采用免疫组化SP法对42例胃癌组织、15例癌旁组织、10 例正常胃组织中Apollon基因表达蛋白进行检测。结果 10 例正常成人胃组织中Apollon基因均无表达,胃癌及癌旁正常组织Apollon基因表达阳性率分别均为80.9 % 和20.0%,胃癌组织明显高于正常及癌旁组织(P0.05);Apollon基因表达与患者的年龄、性别无关(P0.05),而与肿瘤的分级、分期有关(P0.05)。结论 Apollon基因表达升高与胃癌密切相关,可能参与胃癌的发生。   【关键词】 胃癌,Apollon基因,免疫组化   凋亡受抑将导致细胞生存期延长,有利于转化突变的细胞生长积累,最终导致肿瘤的产生。胃癌在发生发展过程中也受此机制影响。Apollon是凋亡抑制蛋白(IAPs)家族具有抗凋亡作用的病毒蛋白,可在一些恶性肿瘤中高度表达。在国外的研究报告中已经指出Apollon基因的表达导致肝癌、新生儿急性髓细胞样白血病的发生〔1〕,对消化道肿瘤的影响国内外尚未报道。本研究采用免疫组织化学方法,检测42例胃癌组织Apollon蛋白的表达情况,并与癌旁组织、正常胃组织作比较,探讨其在胃癌发生发展中的作用。   1 资料与方法   1.1 一般资料   本院2007年3月至2008年6月石蜡包埋标本67例。其中正常胃组织10例,癌旁组织15例,胃癌组织42例。   1.2 试剂   Apollon兔抗人多克隆抗体购于ALEXIS公司;SP试剂盒购自北京中山生物技术有限公司为即用性。   1.3 检验方法   采用免疫组织化学SP染色,石蜡标本切片4 Μm厚,用SP法做Apollon免疫组化染色,染色程序按SP试剂盒说明书进行,每批染色设立用已知阳性组织切片作阳性对照,PBS作为一抗作阴性对照。   1.4 免疫组化染色结果判断   Apollon免疫组化染色以细胞浆内出现棕黄色颗粒者为阳性细胞,每例随机选择10个高倍视野共计算 1 000 个细胞,按阳性细胞数占总细胞数的比例计算阳性表达率,根据阳性细胞着色的范围分为阴性:阳性细胞25%,阳性:阳性细胞 ≥25%。   1.5 统计学处理   统计学分析采用Χ2检验。   2 结果   2.1 定位观察   在正常胃黏膜组织中Apollon蛋白不表达;在胃癌癌组织中Apollon蛋白表达主要位于细胞浆中,偶见于核表达,呈现棕黄色染色颗粒。   2.2 人胃癌组织中Apollon蛋白表达检测   免疫组化检测表明在正常胃腺体中,Apollon蛋白表达均为阴性;癌旁组织表达率20.0%,胃癌标本Apollon表达率80.9%,胃癌组中Apollon基因蛋白表达显著高于正常组织和癌旁组织(均P0.01)。Apollon在男女胃癌患者中的阳性率分别为80.8%和81.2%,无显著差异(P0.05)。在年龄60岁的标本中阳性率为80.0%,而在≤60岁的标本中阳性率为83.3%,也无显著差异(P0.05)。在高、中分化的胃癌组中,阳性表达率为69.2%,而在低、未分化组织中阳性表达率为100%,二者差异显著(P0.05)。有淋巴结转移的胃癌组织中Apollon蛋白表达阳性率为76.9%,而在无淋巴结转移的胃癌组织中有87.5%阳性,两者之间无显著差异(P0.05)。对于淋巴结转移的影响考虑到本实验的病理标本样本量的大小,并不能排除与淋巴结转移无关。在胃癌的分期中可见,Ⅰ、Ⅱ期胃癌Apollon蛋白阳性表达率为65.2%,Ⅲ、Ⅳ期胃癌Apollon蛋白阳性表达率为100%,两者差异显著(P0.05)。   3 讨论   IAPs是最强的内源性凋亡抑制因子,共发现XIAP、cIAP1、cIAP2、NAIP、Apollon、Livin、Survivin、ILP2 8个成员。Apollon是IAPs中分子量最大的成员,含有1个BIR结构域(杆状病毒IAP重复序列)及一个泛素结合结构域(UBC)。分子量为530 kD,含有4 830个氨基酸,是高尔基体外膜蛋白,具有高度保守性。Apollon的BIR序列约有40%与其他IAPs相同〔2〕,是其抑制caspase活性、抗凋亡的重要结构。UBC结构域是Apollon所特有的结构域,位于羧基端,能够加强Apollon的抑凋亡作用。   Apollon/BRUCE的抑制凋亡主要通过结

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