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- 2017-05-26 发布于湖北
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HPLC培训ppt课案
七、高效液相色谱分离模式 基于极性的分离 正相高效液相色谱 图 S -1 代表三个染料混合物的正相色谱分离。极性的固定相最强地保留了极性的黄色染料。相对非极性的蓝色染料在非极性溶剂的流动相保留竞争中胜出,很快被洗脱出来。由于蓝色染料最像流动相[两者都是非极性],它流动得更快。对硅胶柱正相色谱来说,典型的情况流动相是100% 极性较小的有机相,不含水。 样品是极性小的先出峰 图 S -1: 正相色谱法 七、高效液相色谱分离模式 基于极性的分离 反相高效液相色谱(最常用) 反相是指与正相恰好相反的色谱模式,即使用极性流动相和非极性[疏水性如C18]固定相。图 S-2 描述了三种染料的黑色混合物被该种方法分离的过程。 样品是极性大的先出峰 图 S -1: 反相色谱法 七、高效液相色谱分离模式 基于电荷的分离: 离子交换色谱[IEC]离子交换分离的固定相以表面酸碱性强弱和吸附保留的离子类型来划分。阳离子交换是用负电荷表面来保留和分离带正电荷的离子。反之亦然,阴离子交换是用正电荷表面来保留和分离带负电荷的离子。 离子抑制色谱法: 通常改变流动相的pH值被中和,使其失去吸附力而被洗脱 。 使用条件应在填料基质的范围内,硅胶柱的pH在2-8(较保险值3-7)内。 七、高效液相色谱分离模式 基于尺寸大小的分离: 排阻色谱[SEC] - 凝胶渗透色谱[GPC]十九世纪
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