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牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系细胞因子研究 　　作者：于丽红 孙胜菲 作者单位：130042长春市妇产科医院 　长春中医药大学附属医院 　　【摘要】目的：研究健康者和成人牙周炎患者牙周组织中牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系中白细胞介素-4、白细胞介素-10及Γ-干扰素的比例。方法：Elisa法检测牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系中CD4+、CD8+T细胞所占比例，流式细胞仪检测三种细胞因子数量。结果：两组间3种细胞因子表达无显著差异，但部分个体Γ-干扰素表达高于其他两种细胞因子的表达。结论：牙龈卟啉菌阳性个体易患牙周疾病者，Γ-干扰素表达增高。 　　【关键词】 细胞因子 T细胞 牙龈卟啉菌 牙周疾病 　　材料和方法 　　选取7例成人牙周炎患者，指标：至少4个位点上牙周袋5mm，骨吸收6mm，年龄47±3.35岁；10例健康或牙周仅有轻度炎症者，炎症位点不超过4个，骨吸收3.5mm，年龄44.14±2.46岁。 　　牙龈卟啉菌(Pg)［1］及Pg血清学检测；牙周探针深入牙周袋或龈沟内，取出后放入1mlPBS中，Elisa法进行Pg及Pg血清学检测。 　　Pg培养：Pg ATCC33277，常规培养，提取其外膜物质，显微镜下观察菌体。 　　T细胞系的制备：每例个体抽取5ml外周血，高密离心法获取单个核细胞，37℃孵化14天，加入Pg抗体1周后，PBS洗细胞，静置1周；加入IL-2，28天后Pg阳性T细胞系制备完成。 　　流式细胞仪检测：PBS加0.1%盐酸缓冲液冲洗T细胞以获取其外膜物质，加入鼠抗人CD4或CD8抗体，4℃孵化30分钟，分别加入IL-4，IFN-Γ、IL-10抗体，选流式细胞仪检测。进行统计学分析。 　　结果 　　成人牙周炎、健康组两组间CD4+、CD8+T细胞中IFN-Γ与IL-4比值、IFN-Γ与IL-10比值无显著差异。 　　两组间CD4+，CD8+T细胞IFN-7表达量高于IL-4、IL-10表达量。健康个体B的CD4+ T细胞中IL-4、IL-10表达高于IFN-Γ；个体C的IL-10表达高于IFN-Γ；CD8+T细胞中F、G个体IL-4或IL-10表达高于IFN-Γ；成人牙周炎个体CD4+T细胞中，F、G个体IL-4表达高于IL-10，IL-10高于IFN-Γ。其余个体均为IFN-Γ表达量最高，成人牙周炎个体CD4+T细胞中，I、H、O、P、Q5例个体中IL-4和（或）IL-10表达高于或近似于IFN-Γ；CD8+T细胞中，I、H、O、P、q、K6例个体中IL-4和（或）1L-10高于IFN-Γ表达。 　　讨论 　　健康牙龈组织中T细胞记忆细胞不表达IL-4，成人牙周炎牙龈位点用Pg抗体刺激后表达高IL-4。这些研究结果表明，牙周疾病中IL-4的高表达可能打破了其他细胞因子间的平衡。 　　实验证明，在牙周疾病中牙龈组织中IFN-Γ表达显著，本实验中CD4+、CD8+T细胞系中IFN-Γ表达量均高于IL-4、IL-10。根据以上数据推测，在牙周疾病过程中，牙龈牙周组织的破坏可能经由IFN-Γ产生以及巨噬细胞等的潜在刺激引起［2］。Stein等已证实，成人牙周炎患者牙龈组织中IL-10表达量远高于非炎性牙龈组织。同时IL-l0抗原可诱导胶原纤维减少［3］。 　　本研究结果表明，研究健康者和成人牙周炎患者间，牙周组织中牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系中白细胞介素-4、白细胞介素-10及Γ-干扰素表达无显著差异，但部分个体Γ-干扰素表达高于其他两种细胞因子的表达，证实牙龈卟啉菌阳性个体易患牙周疾病者，Γ-干扰素表达增高。 【参考文献】 1 路宝风.牙龈卟啉茵的研究进展.临析医学专科学校学报，2002，24(1)：66-68. 2 杨琼，王雷，房金波.牙龈卟啉菌表面蛋白的生物活性和免疫原性研究.分子科学学报，2003，19（3）：151-155. 3 谢红帽，李昂，苟建重，等.牙龈卟啉菌菌毛的研究进展.陕西医学杂志，2006，35(1)：89-91. 可以免费下载论文的浏览器---文献检索浏览器 KKME---专业医学搜索引擎/