Tune软件操作说明-Q-Exactive series.pdfVIP

1 打开打开 Tune 软件软件 打开打开 软件软件 2 界面及界面及图标介绍图标介绍 界面及界面及图标介绍图标介绍 （1） ON 、Standby、Off，启动扫描时选择 On，待机选择是 Standby （2 ） 打开tune 方法 （3 ） 保存tune 方法 （4 ） 六通阀的切换，只用 a，1 是 waste，2 是 inject （5 ） 质谱注射泵，可以更改流速 （6 ） 三个灯都为绿色是正常状态，第 1 灯：指示仪器通讯是否正常，第 2 个灯：指示仪器硬件状态是否正常，第 3 个灯：指示仪器的性能状态是否正常。典型的变黄 原因有：校正过期。建议重新校正，校正完成之后可恢复绿色。将鼠标放在上述的灯上即可 显示变黄的信息提示。 3 Instrument control 各项参数各项参数 各项参数各项参数 3.1 Scan parameters （1） Scan type：分为 Full MS-SIM 和 AIF-MS/MS ； Full MS ：一级全扫，要求Last mass≤15*first mass SIM：当 full mass 的扫描范围小于 50 个质量数时，自动变为SIM。 AIF：所有的离子全部碎裂，没有母离子的选择性，现在软件无法识别二级子离子是由哪个 母离子产生的，所以暂时不用这种方法。 MS/MS ：设定center/width，或者 scan range，这里设置的是母离子的质荷比； （2 ） Scan range：参考 scan type，scan type 中设置的是full scan 时，这里设置全扫的质荷 比范围，如果 scan type 中选择的是MS/MS ，此处应设置子离子的扫描范围。 （3 ） Fragmentation：分为 source CID 和 NCE ，一般做full scan 时此项是关闭状态 Source CID ：源内裂解，主要用于打开二聚体等非共价结合的键。 NCE ：归一化碰撞能量。仪器校正后，每个特定质荷比的离子都有一个对应将其打碎的能量 值，做小分子设为 35； （4 ） Resolution ：分辨率代表仪器将不同质量数离子分开的能力，QE 可以达到 14 万，最 低分辨率为 1750。QE 中一级扫描的分辨率一般设为70,000，二级分辨率设为 17,500。 （5 ） Polarity：正负扫描模式的选择。 （6 ） Micro scan ：将几张质谱图叠加，一般用 1。 （7 ） Lock mass ：内标校正时使用，常用m/z 455.120025 作为内标物。 （8 ） AGC target ：Orbitrap 容纳的离子数量，因为进入 Orbitrap 中的离子都带电荷，进入 之后会相互干扰 （这种现象称之为空间电荷效应），离子数量过多，会影响质荷比准 6 5 确度，通常一级扫描设为 1*10 ，二级设为 1*10 。 （9 ） Max injection time ： MS1 ：100ms，MS2 ：50ms 。 （10） Hot link ：选中之后，修改参数只需要点击 enter 键就可以，如果不选中，点击 enter 之后还要再点击 apply，才能使用修改后的参数。 3.2 HESI source：源区参数决定数据好坏、质量，离子信号强度； （1） Sheath gas flow rate：帮助溶剂气化，校正时用 5~15，做样品时设为 35~45 ； （2 ） Aux gas flow rate ：气帘气，校正一般为 0 ，做样品时设为 10~15； （3 ） Sweep gas flow rate：吹扫气，流动相中加入不挥发性盐时开启此路气体，设为 1~2； （4 ） Spray voltage：正离子模式 3.5~4.5KV、负离子模式2.5~3.5KV （5 ） Spray current：ESI 喷雾离子所形成的电流反馈值，不能设置；换APCI 源后该处电 会自动变为 Discharge Current ，可设置； （6 ） Capillary temperature ：流速越高，温度越高