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　His Tag蛋白纯化方法之选择全攻略(1)[选购宝典] 生物通技术专题之HisTag蛋白纯化篇：用基因工程的方法来表达蛋白质，必须经过纯化才能实现最终目的。相比核酸纯化来说，不同的蛋白质特性千差万别，纯化条件很难摸索，想找一种通用的纯化方法一直是个难题。将目的蛋白和一个亲和纯化短标签进行融合表达，通过亲和纯化Tag蛋白来纯化目的蛋白，是我们常用的间接手段。 用于融合表达的亲和纯化蛋白标签，首先个子越小越好，这样不会对目标蛋白的构象、大小和特性产生显著影响，方便直接对融合蛋白进行下游操作；以前常用的融合表达亲和标签GST(谷胱甘肽转移酶)个子就比较大，在纯化后需要先切除标签后才能进行下一步的检测分析。其二生理条件下带电越少越好：需要借助融合表达纯化的许多蛋白通常在生理溶液pH下进行分析研究或者复性，融合标签带电少，对蛋白质的表达、分泌、折叠、构象形成等影响小，比较容易得到和天然蛋白相似的产物。第三融合标签的免疫原性越少越好，融合产物不必除去标签可直接作为抗原免疫 横看竖看，6xHis Tag都是比较理想的，6个组氨酸个子小，pH8是不带电，免疫原性差，利用优质的带镍离子的纯化填料进行亲和纯化，目标蛋白纯度高，方法简单方便，成本低，已得到国内外研究人员的广泛应用。想当年刚进实验室时,表达6xHis的HisTag还算“前卫”技术（表达纯化一个带有HisTag的“有重要意义和光辉前景的