骨组织形态计量学方法课案.docVIP

2.5.4 骨组织形态计量学方法 2.5.4.1 不脱钙骨骨标本的包埋 （1）1500ml的甲基丙烯酸甲酯倒入分液漏斗（2L）中。 ② 加入5% NaOH溶液500ml，充分摇匀，静置，待溶液分层后，放出下层溶液，弃去。 ③ 重复操作“2” 三次，三次的总量与单体量相当（洗脱阻滞剂）。 ④ 加入500ml蒸馏水，充分摇匀，静置，待溶液分层后，放出下层溶液，弃去。 ⑤ 重复操作“2” 三次，三次的总量与单体量相当（洗脱NaOH）。 ⑥ 将上述处理过的单体放入无水CaCl2（1000 ml：500g2次。 ⑦ 滤纸过滤，收集滤液。 ⑧ -20℃保存备用，第二天取出看有无冰晶漂浮：无，表明无水可备用；有，则需重新脱水。 （2） ② 脱水 分别通过70%乙醇2天，95%乙醇2天，100%乙醇1天，100%乙醇1天，四个脱水过程，二甲苯透明1天。 ③ 渗透 先后用浸液Ⅰ、浸液Ⅱ、浸液Ⅲ分别浸透2天。 三种浸液的配制方法如下： 浸液Ⅰ 甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，磁力搅拌器上搅拌3小时。 浸液Ⅱ 甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，过氧化笨甲酰1.0g，磁力搅拌器上搅拌4小时。 浸液Ⅲ 甲基丙烯酸甲酯90ml，邻苯二甲酸二丁酯10ml，过氧化苯甲酰2.5g，磁力搅拌器上搅拌6小时。 （3）15 ml的小瓶中，倒入的包埋剂约，盖好瓶盖，并在瓶盖上插一注