第七章-凝胶层析.ppt

第七章 凝胶层析 概述 层析法（也称色谱法）： 早在1903年由俄国植物学家Tswett分离植物色素时采用。 他在研究植物叶的色素成分时，将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内，然后加入石油醚使其自由流下，结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。这种方法因此得名为色谱法。 以后此法逐渐应用于无色物质的分离，“色谱”二字虽已失去原来的含义，但仍被人们沿用至今。 2.层析法的基本原理 层析法是利用混合物中各组分物理化学性质的差异（如吸附力、分子形状及大小、分子亲和力、分配系数等），使各组分在两相中的分布程度不同，从而使各组分以不同的速度移动而达到分离的目的。 其中固定的称为固定相；流过固定相的称为流动相。 根据层析分离机制 凝胶层析 第一节 凝胶层析的基本原理 第二节 凝胶的结构和性质 第三节 凝胶层析的实验条件和操作 第四节 色谱峰变宽的问题（自学） 第五节 凝胶层析的应用 第一节 凝胶层析的基本原理 一、凝胶层析原理 凝胶过滤、分子筛层析、排阻层析、凝胶渗透层析等。 是将样品混合物通过一定孔径的凝胶固定相，由于各组分流经体积的差异，使不同分子量的组分得以分离的层析方法。 二、凝胶层析的重要参数 1. 外水体积、内水体积、基质体积、柱床体积、洗脱体积 ⑴柱体积(VA) ：柱体积是指凝胶装柱后，从柱的底板到凝胶沉积表面的体积。在色谱柱中充满凝胶的部分称为凝胶床，