分析方法概述2.ppt

分析方法概述（第二部分） 廖林川 四川大学华西基础医学与法医学院 分析方法概述（第二部分） 方法可靠性验证（质量控制） 分离净化 纯度 验证项目 收得率 检测 准确性 灵敏度 1.纯度和收得率 * 纯度和收得率是反映检验方法中分离净化效率的指标。 * 纯度反映的是经分离净化后所的试样中杂质含量的多少，杂质的含量越低，则纯度越高。 * 收得率指经分离净化所得试样中欲检测物的量占所取检材中原有实际量百分比。 * 纯度和收得率都是保证检测结果可靠性的要素。但在分离净化过程中，追求高纯度和高收得率是互相矛盾的，需二者兼顾。 2.准确性 定性认证准确性 测值的准确性 精密度 准确度 * 认证准确性 指检材中确实存在，且应该能检识的药毒物或其代谢物（有一定量，有方法），必须能得到认定，并证实不是别的物质。 * 精密度 指多次测得值之间相互接近的程度。常以多次测定值的标准差（RSD）表示，其值越小，精密度越高，说明每次测得值与平均值越接近。 准确度 精密度必须达到要求 准确度 指多次测得值的平均值与真实值之间相互接近的程度。两者之间的差值称“误差”。误差小的方法，准确性高。 精密度好，说明测定的重现性好；但精密度好，并不能说明准确度就好。准确度好而精密度差，凭一、二次测定也很难的出可信的结果。 测定方法两者都必须达到一定要求。 3.灵敏度 检测灵敏度 检测范围 * 检测灵敏度 也称检测限。 指检材或试液中能检出或测定的被检测物的最小量或最小浓度。 一般以检材中的最低相对含量或试液的最低浓度来表示。 * 注意 检材和试液的检测限有不同意义，两者 不一定相同。 * 检测范围 指定性方法中最易观察的范围，或 定量方法中定量最可靠的范围（成线性）。 验证方法  通过多种试验验证方法各项效能以达到控制检验方法质量的目的。 验证方法 模拟试验 通过模拟中毒检材的办法对分析方法效能进行考证。 动物模拟试验 方法 选用一定数量的动物，给以适量药毒物使之成为模型，而后用分析方法检测其生物材料中的药毒物或代谢物。 用途 对入体很快代谢分解、代谢的药毒物， 验证是否能从其生物材料中测得。 * 模拟材料试验 * 选用与实际检材或试样相同或尽可能相似的物 料作为模拟材料，用所用检验方法进行实验验 证的试验。 * 用途 可用于整个分析方法的效能验证，也可 对其中各项操作步骤的效能分别进行验证。 验证方法 空白试验（空白对照试验） 方法 用不含欲检测物的模拟检材，以所用实际 定性分析方法进行检测。（除不加已知待测 物外，其他所用材料、溶剂、试剂、器皿、 操作步骤等都与实际检材的完全相同。） 目的 验证所用物品或操作过程中是否可能引入 阳性干扰物，或是否存在影响结果判断的 物质。便于掌握阳性和阴性结果的辨认。 应用 检验过程中随时可用。 A．单纯性空白试验 * 方法 不用模拟检材，只加试剂，操作与实际方法同。 * 用途 验证所用试剂或操作的可靠性。 B. 模拟空白试验 * 方法 用模拟材料做检材的空白试验。 * 用途 验证是否有来自检材的干扰物。 C.干扰物空白试验 * 方法 在上述两种空白试验的基础上，加入性质与待测物相近似的物质或可能产生干扰的物质。 * 用途 验证所用方法是否能区别待测物和干扰物。 空白试验（空白对照试验） 已知对照试验 方法 在空白试验的基础上，预先加入适量的待测物的已知品，而后实行验证试验。 A．定性验证 * 方法目的 a.加入已知品观察试验结果，如出现应有的特征现象，则证明检识可靠。b. 逐步减少已知品的加入量直到不出现识别特征，可测得检出灵敏度。 * 单纯已知品试验 用以识别所得的检识特征和检出灵敏度。 * 模拟材料试验 与上法结果核对，用以验证 检材及处理过程对检识特征和灵敏度的影响。 * 干扰试验 验证性质与待测物相似的物质对检测的影响