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实验动物的操作方法 第一章 实验动物的获得与处理 标准化实验动物的定义 标准化实验动物的获得 标准化实验动物的处理 标准化实验动物的定义 标准化动物，即由中华人民共和国国家科委颁布的“经人工饲育，对其携带的微生物实行控制，遗传背景清楚或者来源清楚的，用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物” 它保证研究的方法及产品经得起检验(而不受时间、地点或实验材料不同造成显著差异之影响) 标准化实验动物的获得 从已建立的繁殖群中获得标准的实验种群 。但一般的研究小组不具备自行繁殖的条件，故只有通过外购获取。 外购要求：商品化的实验动物必须来源可靠，符合国家实验动物管理委员会的饲养管理和健康标准。 保护使用和接触动物的工作人员及学生的人身安全。在学校里给学生做动物实验时也应从合格的实验动物生产单位购取。 标准化实验动物的处理 (1)运输时必须对它们的健康予以负责。 (2)使用标准化笼具，而且避免重复使用。 (3)运输时间尽可能短暂，避免恶劣气候。 (4)运输过程中要特别注意防止动物逃遁。 第二章 实验动物的麻醉 高等动物实施手术前进行麻醉既是遵守人道善待动物的准则，也是保证实验顺利完成的措施。 对低等动物而言，因其身体柔软，麻醉能够防止身体激烈收缩变形 第一节 麻醉前应有的措施与注意事项 (1)应尽可能使人员避免接触挥发性麻醉药气体。 (2)麻醉剂种类繁多，应用时需根据动物种类及实验性质慎加选择。麻醉必须。 适宜的麻醉状态是呼吸深慢而平稳，角膜反射与运动反应消失、肌肉松弛。 (3)动物在麻醉前应进行足以空腹的一段时间禁食。 二、本实验最常用的麻醉剂 巴比土酸盐药物 苯巴比妥 (长效)，戊巴比妥 (短效或中效)和硫代喷妥 (超短效) 乙醚 镇痛及肌肉松弛效果较好，刺激，易爆 氟烷 镇痛效果差，肌肉松弛程度大。 其它：甲碘酸三卡因(MS-222)、氯胺酮、苯佐卡因 三、麻醉剂的给药途径及方法 吸入式（乙醚） 注射 灌胃法（本试验） 四、无脊椎动物的麻醉与固定 原生动物的运动阻滞： 甲基纤维素液 最简单的阻滞方法：利用脱脂棉花纤维或擦镜纸纤维 原生动物的麻醉 硫酸镍麻醉液 第三章 实验动物基本外科操作 第一节 手术器械及其用途 第二节 采 血 第三节 存活性动物外科操作 第四节 实验动物安死术 第一节 手术器械及其用途 手术刀 手术剪 手术镊 毁髓针 止血钳 玻璃解剖针 注射器和针头 第二节 采 血 豚鼠、兔： 心脏采血 、兔耳中央动脉采血 、颈总动脉采血 小鼠 尾静脉采血、 眼眶后静脉丛采血 禽 类 第三节 存活性动物外科操作 术前准备 术后康复与护理 术后休克的急救措施 止痛 第四节 实验动物安死术 安死术(euthanasia)是指用公众认可的、以人道的方法处死动物的过程。即没有焦虑或惊恐，无痛苦或安静地死亡。 人道安死术的最重要的标准是：具有保证动物中枢神经系统立即失去痛感的早期抑制作用。 一些安死方法从美学上讲举止并不文雅，如断头术或放血致昏法，然而从上述标准来看，不失为人道主义的。记住这一概念，必须根据待处死动物的感觉能力，选择哪种安死术，而不应根据实验操作者或观察者的主观感觉。 方法的选择 (1)疼痛的表现最小，死时没有惊恐； (2)迅速地致死或使其失去意识； (3)方法可靠且可重复； (4)对操作人员安全； (5)心理上与生理上的不良影响最小； (6)研究要求和目的的一致性； (7)对操作者和观察者的情绪影响最小； (8)环境污染最小； (9)施术地点远离或隔开动物房 疼痛和应激的评估 评估可靠性取决于对动物生理反应和异常行为的观察：动物是否恐惧和忧虑。神志清醒动物的异常行为主要表现为：挣扎、跌伏的逃离行为、悲惨地呻吟、防御性攻击或态度冷淡。生理反应表现为：肌肉战栗、瞳孔扩张、反射性排尿和排便、呼吸困难、出汗及心动过速。 从神志清醒的动物身上可以很容易判断出忧虑和恐惧，但在实施安死术过程中，这种判断却不是一件容易的事情。 安死术的各种方法 物理方法 致昏法 减压术 颈椎脱位术 触电法 脑脊髓刺毁法 化学方法 非吸入性药物 吸入麻醉剂 非麻醉性气体 * * 腔肠动物的麻醉 薄荷脑法 蠕形动物的麻醉与固定 对于线虫、蚯蚓，应将虫体洗清后置于自来水内使其麻醉、松弛，或以氯仿、乙醚麻醉，再放人70％浓度的热乙醇中杀死 软体动物的麻醉 硫酸镁或氯化锰或薄荷脑 *