2015 动物细胞工程.ppt

单抗的应用P3第4段 细胞融合的应用P31第3段 动物细胞全能性的表现程度 受精卵、受精卵第一次卵裂的子细胞多能细胞单能细胞高度分化的细胞 低等动物细胞高等动物细胞 多能细胞：如多能造血干细胞、小鼠囊胚原始外胚层 专能细胞：如单能造血干细胞 癌细胞仍能逆转为正常的体细胞，原因？ ①基因组成具有完成性 ②基因突变具有可逆性 动物难于克隆的根本原因 （1）?细胞分化的本质：基因选择性表达的结果。 细胞分化的结果：细胞在形态和功能上高度特化。 （2）?细胞核中基因组完整，具有全能性，但是基因组中的基因并不是同时进行活动，有很多基因不表达任何基因产物。 管家基因：在各种细胞中都处于活动状态，维持细胞生存 奢侈基因：随着组织器官和不同发育阶段选择性表达 实例：血红蛋白 动物难于克隆的根本原因 （3）难以克隆的原因： 分化后的细胞基因组中的基因活动很不完全，可能原因是分化了的细胞形成了一些调节蛋白，这些调节蛋白阻止了基因的表达（使这些基因“关闭”）。一旦这些调节蛋白全部被卵细胞质中的蛋白因子替换，细胞核的全能性得以表达。 动物核移植实验 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核（供体核），来取代另一细胞中的细胞核，形成重建的“合子”或个体。 胚胎细胞核的移植成功率远高于成体细胞 动物体细胞核移植的原理：动物体细胞核具有全能性 电脉冲融合技术 2.多莉的成功证明了什么？ 3.根据细胞生物学机理说明克隆羊获得成功的原因？ 1多莉羊的培育用到了哪些细胞工程技术? 核移植 动物细胞培养 胚胎移植等 21（1）不能 没有将破伤风杆菌抗原注射到小鼠体内，无法得到产生此种抗体的B淋巴细胞 （2）细胞融合 能产生特异性抗体，体外培养条件下能无限增殖 （3）筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞 （4）足够数量的 （5）培养液或小鼠腹水 （6）制备单克隆抗体 22（1）克服远缘杂交不亲和的障碍 （2）制备单克隆抗体 （3）有性 无性 （4）三 31.(1)机械消化、胰酶消化 （2）传代 培养的细胞会因细胞密度过大和代谢消耗，引起营养枯竭而不能正常生长。 （3）胸腺嘧啶 20h 34（1）逆转录 目的 PCR （2）限制性核酸内切酶 DNA连接酶 （3）细胞融合 杂交瘤细胞 （4） A蛋白 RNA序列 抗A蛋白的单克隆抗体 35（1）卵细胞 核移植 3 （2）白面 细胞核 无性 （3）动物细胞细胞核具有全能性 （4）性状差异可能由环境条件引起；可能由于基因突变引起；可能由于受体细胞的细胞质基因不同而引起。 （5）不能 细胞是统一整体，只有保持其结构完整性，才能正常地完成各项生命活动。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 B D B C C C D C D B 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 C D C D B A B C A D 第二章 克隆技术 单元练习 21（1）离体的植物器官、组织或细胞 （或外植体） 植物细胞具有全能性 （2）愈伤组织 相对未分化的活的薄壁 （3）单倍体植株 单倍体育种 （4）绿色 含有控制叶绿体形成的基因 22（1）细胞分裂素 促进细胞分裂 （2）生长素 促进生根 （3）1 3 2 4 （4）植物生长调节剂的配比 23（1）全套基因 受精卵 b （2）无性生殖 （3）细胞核移植 卵细胞体积大、易操作、细胞质丰富、调节蛋白少，有利于细胞核全能性的表达 （4）分化后的动物细胞核 （5）保存濒危动物，繁殖优良品种，克隆器官 24（1）抗原 （2）B淋巴 单一的特异性抗体 大量增殖 （3）杂交瘤细胞 克隆培养法（细胞克隆） （4）抗A单克隆 * 理论上是各种培养细胞 * * 血清 如：小牛血清、人血清 血浆 如：鸡血浆 组织浸出液 如：鸡胚浸出液 淋巴液 如：蛙淋巴液 腹水、生理盐水 天然培养基 人工合成培养基 人工培养液“199”，至今仍在哺乳动物细胞培养中广泛应用 思考：植物培养基与动物培养基上的区别？ 动物培养基其独到之处在于： （1）液体培养基； （2）动物血清 （1）贴壁生长：培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长繁殖。 （2）接触抑制：当培养瓶中内壁生长细胞彼此紧密接触时，细胞不再分裂 三、动物细胞生长特点： 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞贴壁生长 饲养层细胞 细胞易贴附于胶原层或血浆纤维蛋白 1. 动物培养基与植物组织