7.血型与血交叉.pptVIP

（二）Rh血型系统抗原及抗体 1．Rh血型系统抗原 Rh血型系统抗原强度仅次于ABO血型系统的A抗原及B抗原。目前已发现的Rh抗原有45种，其中与人类关系最为密切的是D、E、C、c、e五种，其中以D抗原的抗原性最强，依次是E、C、c、e。 2． Rh血型系统抗体 天然Rh抗体极少，绝大多数Rh抗体由输血或妊娠刺激机体免疫系统产生的IgG型免疫性抗体。主要Rh血型抗体有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五种。其中抗D最为常见。 * （三）Rh血型鉴定 红细胞膜上有D抗原者为Rh阳性，红细胞膜上无D抗原者为Rh阴性。 临床常规应用中只使用抗D血清检查被检红细胞有无D抗原以确定被检者Rh血型。 * （三）Rh血型鉴定检测原理 （1）酶介质法：使用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面的唾液酸，降低红细胞表面的负电荷，减少细胞间的排斥力，促进Rh抗原与相应抗体间的结合从而产生红细胞凝集。 （2）聚凝胺试验：用带高价阳离子的季铵盐，溶解后产生的正电荷中和红细胞表面的负电荷，减少细胞间的排斥力，有利于红细胞凝集。 （3）抗球蛋白试验：又称为Coombs试验，是检测红细胞上不完全抗体的经典方法。利用抗球蛋白抗体作为第2抗体，通过连接致敏红细胞表面的特异性Rh抗体，使致敏红细胞出现特异性凝集。 * （4）人源盐水介质抗D试验：采用免疫球蛋白变性剂（如二硫苏糖）处理人源IgG类抗D血清，使小分子的IgG抗体分子增大成为具有大分子的“IgM”的性质，能在盐水介质中与相应红细胞发生凝集，可用于Rh血型的快速鉴定。 * （5）低离子强度溶液试验：红细胞外围的阴离子是红细胞的稳定因素之一，降低反应介质的离子强度可减少细胞外围的阴离子，促进带正电荷的IgG型Rh抗体与红细胞结合发生凝集反应，从而增加红细胞的凝集强度。 * Rh血型鉴定的方法学评价 方法 评价 酶介质法（直接法） 简单、快速、经济，但灵敏度低。常用于Rh血型鉴定和交叉配血。 酶介质法（间接法） 简单、经济、灵敏。可鉴定抗原和检测抗体。但较费时，准确性和稳定性较差。 低离子强度溶液试验 反应时间短，灵敏度高。 聚凝胺试验 快速、灵敏、准确性高，应用较多。 抗球蛋白试验 检查不完全抗体最可靠方法，但操作复杂，费时，试剂较贵。 人源盐水介质抗D试验 操作简单，特异性和灵敏度均高，应用广泛，但试剂昂贵。 * Rh血型鉴定的质量保证 （1）检测前： ①标本处理：标本新鲜，严防污染。 ②试剂和器材：使用有效期内的合格试剂。使用的仪器、器材清洁干燥。 （2）检测中： ①严格遵守操作规程。 ②严格控制抗原抗体比例、介质浓度、反应时间、反应温度、离心条件等影响检测结果的关键因素。 ③每次实验均须设置阴性对照、阳性对照及试剂对照。 ④红细胞上的Rh抗原与相应抗体反应形成的凝集较弱。 （3）检测后： ①复查实验全过程，查对无误后方可发出报告。 ②标本置4℃保存1周以上，以备复查。 * Rh血型鉴定的临床意义 （1）Rh血型鉴定及交叉配血。 （2）新生儿溶血病诊断。 * 四、交叉配血 交叉配血试验（cross matching test）是在血型鉴定的基础上，进一步检测受血者（blood -recipient）和供血者（blood-donor）血液中是否含有不相配合的成分。 交叉配血试验分两管 主侧为受血者血清与供血者红细胞。 次侧为受血者红细胞与供血者血清。 * 交叉配血的检测原理 盐水配血试验常用。 酶介质试验 抗球蛋白试验 低离子强度盐水试验 凝聚胺试验 微柱凝胶试验均可用于交叉配血试验。 * 几种交叉配血试验的方法学评价 配血方法 优点 缺点 盐水配 血试验 简单、快速，不需要特殊条件。ABO血型交叉配血最常用方法 不能检出不相配的IgG血型抗体 酶介质 配血法 简便、经济、灵敏。可作配血筛查试验，主要检测Rh系统不相合的免疫性抗体 准确性、稳定性相对较差 抗球蛋 白试验 灵敏、结果准确可靠，检查不完全抗体最可靠方法 操作复杂、费时、试剂较贵 凝聚胺 法 快速、灵敏，结果准确可靠、应用广泛，能检出完全抗体和不完全抗体 需要特殊试剂、特殊器材 微柱凝 胶配血法 项目齐全，客观，灵敏、特异、重复性好，结果可保存，可自动化操作，应用广泛 需特殊试剂、器材，成本较高 * 交叉配血质量保证 1．检测前 ①建立标本签收制度，严格查对申请单和标本标签内容是否相符。 ②标本新鲜，无溶血，无污染。有输血或妊娠史患者的血标本应在48h内留取。 ③所用试剂应在有效期内。 ④实验器材清洁、干燥，防止溶血。 * 交叉配血质量保证 2．检测中 ①工作人员有高度的责任感，工作态度严谨。 ②实验器材标记清楚，吸管、滴管专用。 ③红细胞用生理盐水洗涤干净，红细胞的浓度及与标准血清的比例要适