人体脂肪组织DNA提取方法的比较.pdf

FORENSICMED 中国法医学杂志CHINJ 2010年第25卷第4期 人体脂肪组织DNA提取方法的比较 陈荣华1，曹 禹1，蒋铁岩2 (1．上海市公安局物证鉴定中心，上海200083；2．上海市公安局长宁分局刑科所，上海200336) 【关键词】法医物证学；DNA分型；人体脂肪组织；Chelex一100；EZi自动提取仪 【文献标识码】B 【文章编号】1001—5728(2010)04—0265—02 在法医物证学检验中，进行DNA分型的检材多 为血液(痕)、毛发、指甲、肌肉组织及骨骼等‘¨，极少 结果见表1。等位基因的吸收峰值高于50，且杂合子 选择脂肪组织。脂肪组织采用常规方法提取模板 两峰峰高差小于50％，则认为样本在该基凶座分型 DNA效果不佳，本文通过对不同提取方法进行比较， 正确。 以探索可适用于脂肪组织DNA提取的方法。 表1各基因座分型正确的脂肪组织样本数 1材料与方法 1．1样本及其预处理 lO份脂肪组织样本(每份约lOg)分别取自10具 5 新鲜成人尸体的腹部皮下脂肪组织。每份样本各取 Amelogenin D8S1179 5 一半直接进行乙醚脱脂处理备用；另一半用3层干净 D2lSll 5 滤纸包裹，放人毛发压扁器(国产HXMF-I型)中进行 物理性压榨30min，至样本呈“蝉翼”状薄片后用乙醚D7s820 5 脱脂处理备用。同时采集10具尸体的心血作对照。 CSFlP0 4 1．2样本DNA提取 D3S1358 5 ’mOl 5 Chelex一100法将两种预处理好的脂肪样本各 D13S317 5 取5份，剪取适量(约绿豆大小)置Eppendorf管中，采 用Chelex．100法¨J进行提取。 D16S539 5 EZl自动提取仪将两种预处理好的脂肪样本 D2S1338 5 D19S433 5 各取5份，剪取适量(约绿豆大小)分别置Eppendorf vWA 5 G2裂解液、201xLPK酶及IOpLL 管中，加入1901xL TPOX 5 20％SDS，于56℃水浴2h，至裂解液中无明显固体物 D18s51 5 后，用EZl自动提取仪(QIAGEN，Germany)提取。 1．3模板DNA扩增及分型检测 D5S818 5 FCA 5