生化实验基本操作要求.ppt

⑵可调式：在一定容量范围内可根据需要进行调节取加样量。例如规格为50～200μl的可调式定量吸液器，可以在50到200μl的范围内根据需要调节成设计容许的各种取加样容量（60μl、85μl、110μl、170μl、200μl等）。 一般来讲，固定式吸液器比较准确，可调式吸液器使用较为方便。 3.定量吸液器的使用方法： ⑴选择适当的吸液器。吸液前先把吸嘴套在吸引管上，套上后要轻轻旋紧一下，以保证结合严密。 ⑵持法：右手四指（除大拇指外）并拢握住吸液器外壳（使外壳突起部分搭在食指近端），大拇指轻轻放在吸液器的按钮上。 ⑶取样(吸液)：用大拇指按下按钮到第一停止点，以排出一定容量的空气，随后把吸嘴尖浸入取样液内，徐徐松开大拇指，让按钮慢慢自行复原，取样即告完成。 ⑷排液：将吸液器的吸嘴尖置于加样容器壁上，用大拇指慢慢地将按钮按下到第一停止点，停留1秒钟（粘性较高的溶液停留时间应适当延长）。然后再把按钮按到第二停止点上，让吸嘴沿管壁向上滑动。当吸嘴尖与容器壁或溶液离开时，方可释放按钮，使其恢复到初始位置。 ⑸吸液器用后应及时取下吸嘴。将吸嘴用自来水冲洗后浸入盛水的容器内（以防干涸），待实验结束后集中仔细清洗。 三. 生物化学实验基本操作——溶液的混匀 ㈠混匀的目的： ⒈使反应体系内的各种物质分子很好地互相接触，充分进行反应； ⒉使欲稀释的溶液成为浓度均一的溶液。 LOGO * * 生物化学实验基本操作 一. 生物化学实验基本操作——玻璃仪器的洗涤 洗涤干净的标准：在生化实验中，玻璃仪器洁净与否，是获得准确结果的重要环节。洁净的玻璃仪器内壁应十分明亮光洁，无水珠附着在玻壁上。 ㈠ 常用的洗涤方法： 1.一般仪器（如烧杯、试管等）： 可用毛刷蘸肥皂液、合成洗涤剂仔细刷洗。然后用自来水反复冲洗，最后用少量蒸馏水冲洗2~3次，倒置在器皿架上晾干或置于烘箱烤干备用。 2.容量分析仪器（如吸量管、容量瓶、滴定管等）： 不能用毛刷刷洗。用后应及时用自来水多次冲洗，细心检查洁净程度，根据挂不挂水珠采取不同处理方法。 （1）如不挂水珠，用蒸馏水冲洗、干燥，方法同上； （2）如挂水珠，则应沥干后用重铬酸钾洗液浸泡4~6小时，然后按上法顺序操作，即先用自来水冲洗，再用蒸馏水冲洗，最后干燥。 3.粘附有血浆的刻度吸量管等，有三种洗涤方法： （1）先用45%尿素溶液浸泡，使血浆蛋白溶解，然后用自来水冲洗； （2）也可用1%氨水浸泡，使血浆溶解，然后再依次用1%稀盐酸溶液、自来水冲洗； （3）以上二法如达不到清洁要求，可浸泡于重铬酸钾洗液4~6小时，再用大量自来水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2~3次。 4.新购置的玻璃仪器: 应先置于1~2%稀盐酸溶液中浸泡2~6小时，除去附着的游离碱，再用自来水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗2~3次。 凡用过的玻璃仪器，均应立即洗涤，久置 干涸后洗涤十分困难。如不能及时洗涤，先用流水初步冲洗后浸泡在清水中，待后按常规处理。 二. 生物化学实验基本操作——吸量管的使用 吸量管和定量吸(移)液器(微量加样器)均为用来转移一定体积溶液的量器。 ㈠ 吸量管：生化实验中常用的有三种，最常用的是刻度吸量管。 1.刻度吸量管： ⑴刻度吸量管的种类： ①按容量规格来分，有0.1、0.2、0.25、0.5、1、2、5、10ml等数种。其精密度按不同的容积可达移取量的0.1~1%。通常将管身标明的总容量分刻为100等分。因此，10ml的吸量管一格代表0.1ml；1ml的吸量管一格代表0.01ml,其余类推。 ②按“零”点位置来分，有“0”点在吸量管上端的（即读数从上而下逐渐增大），也有“0”点在吸量管下端的（读数从下而上逐渐增大)。两种标示方法，在使用时各有方便之处。 ③按刻度方法来分，刻度吸量管也有两种，一种是刻度刻到尖端的，将液体放出时，应吹出残留在吸量管尖端的少量液体，另一种是刻度不刻到尖端的。 ⑵刻度吸量管的正确使用方法： 用右手拇指和中指夹住管身，将吸量管的尖端伸入试液深处，左手持洗耳球把试液吸入管内至高过刻度以上时，迅速用右手食指按住吸量管的上口，以控制试液的泄放。吸液后应尽量使吸量管保持垂直，使右眼与刻度等高，稍微轻抬食指或轻轻转动吸量管，使试液面缓慢降落，至管内试液弯月面的最低点与吸量管的刻度线相齐为止。