食品中还原性抗坏血酸测定.pptVIP

食品中还原型抗坏血酸的测定 进入实验室要求 1、使用化学试剂时要注意人身安全。 2、注意玻璃器皿的使用，破碎。 3、仪器使用必须按照操作说明及教师指导进行，盲目操作导致损坏者后果自负。 4、实验器材用过后要及时清洗，实验结束后，要将器材摆放整齐。 5、课代表每次课均要安排值日生，负责打扫卫生。 6、课代表在每次实验课结束后要填写实验室使用记录、仪器使用记录本、多媒体使用记录等。 一、目的要求： （一）掌握还原型抗坏血酸的测定原理。 （二）熟悉维生素C的生理作用及缺乏症。 （三）了解本次实验的操作步骤及注意事项。 二、原理 三、仪器与试剂 （一）仪器 1.组织匀浆机 2.微量滴定管 3.量筒、烧杯、吸管、锥形瓶 4.天平 （二）试剂 1. 1%草酸、2%草酸 2. 白陶土 3. 抗坏血酸标准液：秤取0.1g纯抗坏血酸，溶解于1%草酸中，并用蒸馏水稀释至100ml，再取其中1ml稀释至50ml，迅速用以标定染料。（最好临用前配制） （二）试剂 4. 0.02% 2，6—二氯酚靛酚：溶解50mg 2，6—二氯酚靛酚于200ml含52mg碳酸氢钠的热溶液中，冷却后稀释至250ml，过滤后装于棕色瓶中，每周标定一次。 5.蔬菜水果：番茄、柿子椒、甘蓝、柑橘、橙子、鲜枣、猕猴桃等。 四、操作步骤 （一） 2，6-二氯酚靛酚溶液标定 取5ml新配置的抗坏血酸标准液，加5ml 1%草酸于三角瓶中摇匀，用2，6-二氯酚靛酚滴定至粉红色15秒不退为终点，所用上液的量相当于0.1mg 抗坏血酸。 由此计算：1ml 溶液相当于抗坏血酸的毫克数 经标定后计算得： 1ml溶液相当于抗坏血酸0.05mg，即0.05mg/ml （二）样品测定 1. 称取样品100g，稍加切碎后置于组织匀浆机中，加入100ml的2%草酸溶液，制成匀浆； 2. 取10g 匀浆于100ml量筒内，小心的以1%草酸稀释至100ml，摇匀，静置； （二）样品测定 3. 加一勺白陶土脱色, 过滤，备用； 4. 取滤液5ml于锥形瓶中，立即用2，6-二氯酚靛酚滴定至粉红色存在15秒不退为终点,记录2，6-二氯酚靛酚的用量V1ml。测两次取其平均值; 5.用蒸馏水做空白对照，记录2，6-二氯酚靛酚的用量V2ml. 6.计算5ml滤液中含有的样品克数W（？g） 五、计算 计算 100g 样品中还原型抗坏血酸的含量： V1—滴定时所用染料溶液的毫升数 V2—空白滴定时所用染料溶液的毫升数 C —1ml 染料相当于抗坏血酸毫克数（0.05mg/ml） W —所用滤液中含有的样品克数 六、注意事项 1. 操作过程要迅速，因为还原型抗坏血酸易被氧化，一般不超过2min。 2. 食物匀浆在量筒中振摇可能产生泡沫，可加数滴异戊醇去除泡沫。 六、注意事项 3. 样品匀浆液有颜色时，应加入一勺白陶土，振摇脱色，过滤后，再取上层液滴定。 4. 样品中可能含有其它杂质，也能还原2，6-二氯酚靛酚，但还原染料的速度较抗坏血酸慢，所以滴定时以15s粉红色不退为终点。 七、思考题? 这种测量维生素C方法的优缺点是什么? 用蒸馏水做空白对照的作用是什么? 实验报告书写内容 一、目的要求 二、实验原理 三、操作步骤 四、实验结果 五、分析讨论 五、计算 计算 100g 样品中还原型抗坏血酸的含量： V—滴定时所用2，6-二氯酚靛酚的毫升数 C—1ml 染料相当于抗坏血酸毫克（0.05mg/ml） W—5ml滤液中含有的样品克数 (0.25g) * * * * 还原型抗坏血酸有还原性，能还原染料2，6—二氯酚靛酚，该染料在酸性溶液中呈红色，被还原后红色消失，当被测溶液中过量一滴染料时即显红色，以示终点。 在无杂质干扰时，被测溶液还原染料的量与其中所含抗坏血酸的浓度成正比。 2，6—二氯酚靛酚 (碱性－蓝色） H+ 2，6—二氯酚靛酚 (酸性－红色） 还原型抗坏血酸 还原 还原态2，6—二氯酚靛酚 (无色） 过量2，6—二氯酚靛酚 (酸性－红色） 0.02mg/ml 说明： 实验报告一律使用实验报告本； 学生完成实验报告后由课代表收齐后交给指导教师。 100gx10gx5ml 200gx100ml =0.25g *