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第一章DNA 1、DNA 1) DNA的变性和复性 ■变性（Denaturation) DNA双链的氢键断裂，最后完全变成单链的过程称为变性。 ■增色效应(Hyperchromatic effect)在DNA变性过程中，260nm紫外线吸收值上升的现象，称为增色效应。 ■融解温度（Melting temperature ，Tm ) 变性过程紫外线吸收值增加的中点称为融解温度。生理条件下为85-95℃ 影响因素：G+C含量，pH值，离子强度，尿素，甲酰胺等 ■复性（Renaturation)热变性的DNA缓慢冷却，单链恢复成双链。 ■减色效应（Hypochromatic effect) 随着DNA的复性，260nm紫外线吸收值降低的现象。 C值反常现象（C-value paradox) ：C值是一种生物的单倍体基因组DNA的总量。 真核细胞基因组的最大特点是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开，这就是著名的“C值反常现象”。 7. 非组蛋白：指细胞核中组蛋白以外的蛋白质 “一个基因一个酶” 一个顺反子一条多肽链；一个基因一条多肽链 9.基因 (gene)： 合成有功能的蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核苷酸序列。 10.一个典型的真核基因：①编码序列：外显子(exon)②插入外显子之间的非编码序列：内合子(intron)③5-端和3-端非翻译区(UTR) ④调控序列(可位于上述三种序列中) 基因组的大小用全部DNA的碱基对总数表示 原核生物与真核生物基因组比较 原核生物基因组 真核生物基因组 通常由一条双链DNA组成，一般为单拷贝。 一般为双倍体（两份同源基因组） 基因是连续的，无内含子 基因是断裂的既编码序列被非编码序列隔开 基因组重复序列很少 基因组重复序列很多 具有编码同工酶的基因 功能相关基因称基因家族，可串联，也可相距很远 编码顺序一般不会重叠 编码顺序一般不会重叠 15.有重叠基因（Sanger发现）：同一段DNA含有两种不同蛋白质的信息 16.内含子（Intron）是一个基因中非编码DNA片段，它分开相邻的外显子。 外显子 (Exon) 是真核生物基因的一部分，它在成熟mRNA剪接 (Splicing)后仍会被保存下来，所有的外显子一同组成了遗传信息，并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质 17.真核基因组中存在大量的顺式作用元件，包括启动子，增强子，沉默子等； 18 DNA的一级结构：指4种脱氧核苷酸的连接及其排列顺序， DNA序列是这一概念的简称。碱基序列 2）特征： a 双链反向平行配对而成 b 脱氧核糖和磷酸交替连接，构成DNA骨架，碱基排在内侧 c 内侧碱基通过氢键互补形成碱基对（A：T，C：G）。 根据一种DNA序列在基因组中具有的拷贝数，可将真核生物基因组中DNA序列分为（高度重复序列）?T 含量很高的简单高度重复序列。 20.DNA 的二级结构：指两条多核苷酸链反向平行盘绕所产生的双螺旋结构。 分类：右手螺旋：A-DNA，B-DNA 左手螺旋：Z-DNA 21. DNA的高级结构：指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。 主要形式：超螺旋结构（正超螺旋和负超螺旋） 22.DNA的半保留复制:由亲代DNA生成子代DNA时，每个新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式称半保留复制。 DNA半保留复制的生物学意义：DNA的半保留复制表明DNA在代谢上的稳定性，保证亲代的遗传信息稳定地传递给后代。 23.与DNA复制有关的物质 1．原料：四种脱氧核苷三磷酸dNTP（dATP、dGTP、dCTP、dTTP) 2．模板：以DNA的两条链为模板链，合成子代DNA 3．引物：DNA的合成需要一段RNA链作为引物,提供3’-OH末端使dNTP可以依次聚合 4．蛋白质类：引物酶，DNA聚合酶，DNA连接酶，解螺旋酶，单链DNA结合蛋白，DNA拓补异构酶。 DNA聚合酶，DNA连接酶，DNA拓补异构酶都催化3’ ,5’-磷酸二酯键的生成，但各有不同。 原核生物的DNA聚合酶 性质 聚合酶Ⅰ 聚合酶Ⅱ 聚合酶Ⅲ 3 5 外切活性 + + + 5 3 外切活性 + + - 5 3聚合活性 + 中 + 很低 + 很高 功能 复制过程中校读，修复，填补缺口 Wlenow片段 参与DNA损伤应急状态修复（SoS修复） DNA 复制的主要聚合酶，还具有3→5’外切酶的校对功能，提高DNA复制的保真性 5.DNA链的合成方向为5 ( ( 3 ( 真核生物的DNA聚合酶 DNA-pol(DN聚合酶) α β γ δ ε 分子量（kDa） 16.5 4.0 14.0