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siRNA 的体内递送 * 师明磊，赵志虎 ，王洋，陈惠鹏 军事医学科学院生物工程研究所，北京 100071 摘要：RNA干扰是一种由小干扰RNA介导的转录后基因沉默。自利用RNAi沉默目的基因获得成功以来，体内应用RNAi 的研究受到高度重视。由于siRNA本身的不稳定性以及体内的复杂环境，siRNA递送的安全性与有效性成为目前关注的 重点。文章就目前报道的siRNA体内的递送方式进行了综述。 关键词：RNAi; siRNA; siRNA递送 In vivo delivery of siRNA SHI Ming-Lei, ZHAO Zhi-Hu, WANG Yang, CHEN Hui-Peng Beijing Institute of Biotechnology, Beijing 100071, China Abstract: RNA interference (RNAi) is a mechanism of posttranscriptional gene silencing mediated by small interfering RNA (siRNA). The ability of synthetic siRNA to silence genes in vivo has made it well suited as therapeutic drug, but the instability and polarity of siRNA and the complexity of in vivo circumstances retarded rapid development of RNAi-based therapies. In this review, a summary of the advances in in vivo siRNA delivery is presented and discussed. Keywords: RNAi; siRNA; siRNA delivery RNA干扰（RNA interference, RNAi ），是一种能够有效抑制基因表达的靶向性转录后基因沉默机制 [1] [2] 。自Fire等 在 1998 年发现并应用这种技术以来，它迅速成长为确认药物靶标和研究基因功能的有力 工具。现在，运用RNAi治疗遗传相关疾病也进入临床实验，有望成为新的治疗药物[3] 。早期RNAi研究 着重预测siRNA （Small interfering RNA）的活性。目前，由于可以免费获得高精度预测siRNA的方法， [4] 人们意识到应用RNAi面临的主要问题是如何将其递送到生物体内 。 siRNA递送面临的主要困难是：1）siRNA极不稳定：在血浆中，由于核酸酶的存在，siRNA的半 衰期不到 15 min[5] ；2 ）siRNA进入作用靶位要经受重重挑战：由于siRNA的极性，它很难穿过脂质双 分子层构成的细胞膜，siRNA 在体内面临着不能迅速穿过血管内皮，滞留于肝脾等储血器官，被肾脏 排泄，在胞内不能被释放，以及被胞内核酸酶降解等不利因素[6] ；3 ）全身性给药要求siRNA必须具有 靶向性：过去几年的实验证明，体细胞对siRNA会产生强烈的炎症反应[7] ，非靶向的细胞会摄取大量 siRNA，在大量消耗siRNA的同时，还增强了炎症反应的程度。针对这些困难，人们探索、改进了多种 不同的siRNA递送手段。 1 病毒载体递送 1.1 腺病毒载体与腺相关病毒载体 腺病毒载体曾被广泛应用于基因治疗。由于其较强的细胞毒性和肝毒性，多用于局部注射。2002 年Li等[8]首次报道了局部定向注射shRNA腺病毒表达载体对中枢神经系统进行RNAi治疗。运用局部定 向注射shRNA腺病毒表达载体治疗肿瘤也取得较好结果[9~12] ，但是局部注射不能适用于所有类型的肿 瘤。与腺病毒载体相比，腺相关病毒载体只有很低的细胞毒性，且具有感染分裂和非分裂细胞的能力， 能特异性整合到人类宿主细胞的 19 号染色体，整合位点本身也不编码任何重要基因，避免了对宿主基 [13] 因组的干扰。腺相关病毒载体也都采用局部定向注射递送 。 1.2 逆转录病毒