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第七章 病毒的遗传分析 3学时 第一节、病 毒 概 述 一、病毒的一般特性与类型 1、病毒的一般特性 病毒无细胞结构，不属于原核生物，单独一类.病毒没有合成蛋白质外壳所必须的核糖体,所以必须感染活细胞，利用宿主的代谢合成机器、能量和合成核酸与蛋白质的底物，才能合成新的病毒后代。 病毒 = 蛋白质外壳 (衣壳) + 核酸 (DNA或RNA) 2、病毒的类型 在遗传学研究中使用最为广泛的是噬菌体 三大特点：繁殖周期短、易得大群体、基因组小。 SARS病毒——一种全新的冠状病毒 冠状病毒的遗传物质是一个单一的RNA分子。这种RNA和N蛋白共同组成病毒，有三个结构蛋白，属糖蛋白。 冠状病毒的特点是RNA和RNA之间重组率非常高，出现变异正是由于这种很高的重组率。 禽流感病毒 二、噬菌体的繁殖 2、温和噬菌体的侵染周期 温和性噬菌体中λ和P1噬菌体各代表了一种略有不同的溶源性类型 温和性噬菌体的生活周期有两个： 一个是溶源性周期，即在噬菌体侵入后并不裂解细菌，而是将其DNA分子整合到细菌基因组DNA上，这样的噬菌体叫原噬菌体。带有原噬菌体的细菌叫溶源性细菌。 溶源性细菌有两个特点：一是免疫性，二是可诱导 另一个是裂解周期，即在有关因素诱导下，原噬菌体基因依次表达，产生大量子代噬菌体，并裂解细菌细胞后释放出来。 λ噬菌体的生活周期 整合到宿主基因组中的原噬菌体仅少数基因活动，表达出阻遏物关闭自身其它基因 P1噬菌体的生活周期 T7 噬菌体 三、噬菌体的突变型 1、条件致死突变型 能够得到的噬菌体突变型有形态突变型（噬菌斑大小、边缘清晰度、透明程度的变化）、寄主范围突变型和条件突变型。 条件致死突变型：在某些条件下是致死的。使条件致死突变型噬菌体不能存活或繁殖的条件叫限制条件；条件致死突变型噬菌体能够存活或繁殖的条件叫许可条件。 常见的条件致死突变型有两种： ①温度敏感突变：热敏突变→限制条件≥40℃ 冷敏突变→较低温度下致死 ②抑制因子敏感型突变sus:噬菌体发生了无义突变 许可条件→宿主菌带有抑制因子（su+） 限制条件→宿主菌没有抑制因子（su-） 2、噬菌斑形态和宿主范围的突变型 ①噬菌斑形态突变型 ②宿主范围的突变型 宿主范围的突变型其本质也是条件致死突变型之一。 T4噬菌体rⅡ突变侵染大肠杆菌B能产生大的噬菌斑，侵染大肠杆菌K是致死的，侵染S产生小的噬菌斑。 抑制因子敏感型突变sus实质就是无义突变，即编码氨基酸的正常密码子突变成了终止密码: →UAA:赭石突变、→UAG:琥珀突变、→UGA:乳白突变。 宿主菌的无义抑制基因su+也是一种突变基因，即携带某个氨基酸的tRNA的反密码子突变成了与一个终止密码互补的特殊反密码子，与噬菌体的无义突变能互补配对，合成正常长度的蛋白质。 无义抑制当然也会使其它基因编码的蛋白质变得更长，但正常（野生型）蛋白质仍占多数。 第二节：噬菌体染色体作图 一、噬菌体突变型的两点测验 2、由于h–和h+均能感染品系1，用T2的两个亲本h–r+和h+r–同时双重感染品系1,即可得到重组型噬菌体。 h-r+ × h+r- ↓品系1 h-r+ h+r- h-r- h+r+ 不同速溶菌的突变型在表现型上不同，可分别写成ra-、rb-、rc-等，用rx–h+×rx+h-　获得试验结果列于下表： 杂交组合　　　　各基因型（%）　　 重组值 　　　　　　r-h+　r+h-　 r+h+　r-h- Ra-h+×ra+h- 34.0　42.0 12.0　12.0 24.0/100=24% Rb-h+×rb+h- 32.0　56.0 5.9　6.4 12.3/100.3=12.3% Rc-h+×rc+h- 39.0　59.0 0.7 0.9　　　1.6/99.6=1.6% 二、噬菌体突变型的三点测验 Kaiser(1955)最先进行l噬菌体的重组作图。紫外线照射处理?获5个l噬菌体突变系,产生不同噬菌斑： co1系:中央环之外部分表现清亮；co2系:更浓密的中央环 λ噬菌体的基因组遗传图 2、噬菌体突变基因的重组特点 1)、两个亲代对子代的遗传贡献很难完全相同 两个亲代对子代的遗传贡献，取决于进行双重感染时两个亲代噬菌体各自的用量 噬菌体的用量 = 裂解液的滴度×体积 分离群体：亲本型Ⅰ的量 ≠ 亲本型Ⅱ的量 2)、不能区分子代噬菌体是第一代还是第几代 噬菌体在DNA复制以后即进行基因重组。一个受到双重感染的宿主菌细胞内，噬菌体不断地重复着“复制?重组”循环，直到噬菌体DNA 被外壳蛋白包装起来为止。一个裂解前的宿主