细菌和噬菌体的遗传分析2.ppt

（二）局限性转导 把带gal+的大肠杆菌的溶源性菌株K12（?）用紫外线照射诱导，使之释放噬菌体，然后把各种营养缺陷型和糖类不发酵突变型大肠杆菌与噬菌体接触，经一段时间后，接种在各种选择培养基上，观察有无转导子（体）的出现，结果发现，在gal-（被感染的）中出现了gal+ 转导子。 供体菌的染色体片段在转导过程中被转移到受体菌中，经重组后整合到受体菌的染色体上，形成转导子。 除此之外，没有其它转导子，即?噬菌体只能转导gal+基因。 第三节 噬菌体的遗传分析 五、转 导 局限性转导（特异性转导；特定转导）：噬菌体仅能转移少数特定基因的 转导叫局限性转导。 1、实验现象： 局限性转导由温和噬菌体介导进行。如λ的DNA，既可以以自主的状态存在，也可以整合在细菌染色体中。 多数噬菌体当整合在细菌染色体中时都占有一个特定的位置。例如λ，在大肠杆菌中的附着点(attλ)一边具有半乳糖操纵子gal，另一边具有生物素(biotin)合成的基因bio 。 第三节 噬菌体的遗传分析 五、转 导 2、局限性转导的特点： 溶源起始：　 　　在染色体的 特定位点整合。 原噬菌体离开细菌染色体时，偶尔可将噬菌体插入位点两边的细菌基因一起环落下来而形成混杂的DNA片段，该DNA片段由噬菌体蛋白质衣壳包裹，再去侵染其他宿主细菌，可将特定的细菌基因带入新的受体菌，进而重组整合。 第三节 噬菌体的遗传分析 五、转 导 裂解起始：　 　　正常环出。 不正常的环出：通过不规则交换，携带出部分细菌染色体区段，产生转导噬菌体?dgal+，又叫特殊性转导颗粒。 10-6 λPbio：λ噬菌体包裹了其一端的大肠杆菌的bio 座位，它就会丢掉其另一端 的一部分调节序列，丢失的这部分序列是溶源性所必需的，而和λ的 裂解周期无关，所以产生的转导噬菌体能裂解细胞和产生噬菌斑，这 种转导颗粒被称作λpbio，p表示噬菌斑的形成。 λdgal：如果λ噬菌体包裹了另一端的大肠杆菌的gal座位，它就会其丢掉另 一端的与裂解周期有关的基因，形成的转导噬菌体是有缺陷的，称为 λdgal，d表示“缺陷”。 这种有缺陷的噬菌体需要正常噬菌体即所谓帮助噬菌体（helper phage）为其提供复制所需的功能。 第三节 噬菌体的遗传分析 五、转 导 转导仅限于靠近原噬菌体附着点的基因，如λ专门转导大肠杆菌的gal和bio基因。所以这种转导叫做特殊性转导或局限性转导。 重组性转导： 溶源性转导： 正常的? 噬菌体和转导噬菌体?dgal+ 同时感染gal- 受体菌，导致溶源性转导。 第三节 噬菌体的遗传分析 五、转 导 溶源性转导：正常的? 噬菌体和转导噬菌体?dgal+ 同时感染gal- 受体菌，整合到gal+ 基因座位附近，成为原噬菌体，使大肠杆菌变成溶源菌。 转导噬菌体?dgal+ 去感染gal-细菌，形成?dgal+/ gal-型。其中少部分形成稳定的gal+ 型（交换整合），多数是不稳定的部分二倍体?dgal+/ gal- 型，其少数情况下会分离gal- 细胞。因?dgal+ 不能复制，在细胞分裂中被稀释或丢失。 第三节 噬菌体的遗传分析 五、转 导 第三节 噬菌体的遗传分析 五、转 导 在一般转导中，供体大肠杆菌的基因型是trp C+ pyr F- trp A-，受体菌株的基因型为trp C- pyr F+ trp A+，在P1噬菌体介导的转导中，对trp C+ 的菌株进行选择，用选择的结果进一步检验其他基因转导情况，得到以下结果： 基因型 后代数目 trp C+ pyr F- trp A- 279 trp C+ pyr F+ trp A- 279 trp C+ pyr F- trp A+ 2 trp C+ pyr F+ trp A+ 46 问：（1）这3个基因的顺序；（2）计算try C和pyr F及trp A的共转导频率；（3）假定P1染色体长10c