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人MMP9 Elisa试剂盒
人 MMP9 定量分析酶联免疫检测试剂盒
本试剂盒仅供科研使用。用于体外定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的 MMP9 浓度。使用前请仔细阅读
说明书并检查试剂组分是否完整, 如有疑问请与北京博凌科为生物科技有限公司联系,我们将提供力所能及的帮助。
如您有其它需求,请登录北京博凌科为生物科技有限公司网站或致电本公司。
MMP9简介:
MMPs蛋白是一组具有锌指结构的钙依赖的能够降解胞间基质成分的一组蛋白的统称。MMP-9是该蛋白家
族成员中的研究较多的一种,是一种明胶酶(明胶酶B)。MMP-9有许多作用底物,如Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ、Ⅺ型
胶原、蛋白聚糖的核心蛋白、明胶、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹性蛋白等。
结构上,MMP-9的催化区包括3个重复的型纤维连接蛋白结构域,与明胶或弹性蛋白有高度的亲和力。MMP-9
还有脯氨酸丰富的结构域和含锌指结构的结构域,MMP-9包含一个V型的胶原蛋白结构域,这个结构域有高度的
糖基化作用,,它影响底物的特异性以及有抗衰变的作用。
MMP-9 是以酶原的形式从胞内分泌到胞外,可被 MMP-3、MMP-2 或者次氯酸裂解, MMP-3 可能是 MMP-9
最有效的激活剂。金属蛋白酶组织抑制因子 1(TIMP-1)作为 MMP-9 的抑制剂,与 MMP-9 的酶原或活化后酶
的催化区的羧末端特异性
结合,形成复合物。
MMP-9可由角化细胞、单核细胞、巨噬细胞和多形核白细胞等产生,在一些炎性反应的过程中常伴随着
MMP-9的产生。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中MMP9 的浓度。MMP9 捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本
或参考品时,其中的MMP9 会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人MMP9
抗体后,抗人MMP9 抗体与MMP9 接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入
辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;
其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在MMP9 将会形成免疫复合物,辣根过氧化物
酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,MMP9 浓
度与OD 值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中MMP9 浓度。
450
人定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:
组分 规格
预包被板 12条 或 6条
样本分析缓冲液 1瓶5ml/3 ml
标准品稀释液 10ml/5ml
标准品 2/1支(冻干)
生物素化抗体 1瓶10ml/5ml
HRP连接的酶结合物 1瓶10ml/5ml
浓缩洗涤液 20× 30ml/瓶
TMB底物 1瓶10ml/5 ml
终止液 1瓶5ml/3 ml
封板胶纸 3/2张
说明书 1份
标本收集:
1.标本的收集请按下列流程进行操作:
BeijingBLKW BiotechnologyCo.,Ltd. Tel:01052872342 blkwbio@
A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可;
B.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;
C.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集; D.标本收集后请分装,若待测样本不能及时检测,冻存于-20℃,避免反复
冻融。
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
3.标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除;
4.请勿使用溶血高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
注:正常人血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。
注意事项:
1.试剂盒请保存在2~8℃。
2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶
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