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人sICAM-1 ELISA kit说明书
human sICAM-1 ELISA KIT
目录号 规格
FHK0027 96 Tests
FHK0027 48 Tests
( 本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中天然和重组sICAM-1 浓度,供科
研使用。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分, 若有任何疑问请与嘉美生物技术有限
公司联系,您将得到我们的技术支持。
$
简介:
细胞粘附分子-1(Intercellular adhesion molecule-1,ICAM -1)属免疫球蛋白超家族成
员,分布于活化的内皮细胞,淋巴细胞表面, 其配体 淋巴细胞功能相关抗原-1(Lymphocyte
function associated antigen-1, LFA-1), 主要存在淋巴细胞表面。ICAM -1/LFA-1 相互作用能
介导淋巴细胞与血管内皮细胞粘附,促进淋巴细胞向组织中浸润。在免疫监督、炎症反应、吞噬
过程、动脉粥样硬化等过程中起着重要的作用。
检测原理:
实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人sICAM-1单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的sICAM-1会
与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人sICAM-1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲合
素。生物素与亲合素特异性结合;抗人
sICAM-1抗体与结合在单抗上的人sICAM-1结
合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。
加入显色剂,若反应孔中有sICAM-1,辣根
过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终
止液变黄。在450nm处测OD值,sICAM-1浓度
与OD 值之间呈正比,可通过绘 标准曲线
450
求出标本中sICAM-1浓度。
标本收集:
1. 收集血液的试管应为无热原和内毒素试管。
2. 血浆抗凝剂推荐EDTA。
3. 避免溶血,高血脂标本。
4. 标 应清澈透明,悬浮物应离心去除。
5. 标 收集后若不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。
6. 可根据实际情况,将标 做适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数) 。
注:血清或血浆样本建议做1:150~1:200 稀释。
试剂盒组成:
1a 标准品 2/1支(冻干)* 4℃
1b 标准品和标 稀释液 4/2 瓶 4℃
2a 浓缩生物素化抗体 2/1支* 4℃
2b 生物素化抗体稀释液 1瓶 4℃
3a 浓缩酶结合物 2/1支* 4℃(避光)
3b 酶结合物稀释液 1瓶 4℃
4 浓缩洗涤液 20 × 1瓶 4℃
显色剂 1瓶 4℃(避光)
终止液 1瓶 4℃
抗体包被板条 8 ×12 或 8 ×6* 4℃
封板胶纸 3/2张*
说明书 1份 *:[96/48 Tests]
实验器材(不提供,但可协助购买) :
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加液器及吸头:0.5-10,2-20,20-200,200-1000ul
3. 37℃温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸。
注意事项:
1. 试剂盒保存在2-8℃,除复溶后的标准品,其他成分不可冻结。
2. 浓缩生物素化抗体(2a)、浓缩酶结合物(3a)装量极少,运输中颠簸和可能的倒置,会使液体
沾到管壁或瓶盖。因此使用 请用手甩几下或离心处理,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到
管底。
3. 从冰箱中取
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