草鱼垂体STH细胞组织化学和超微结构研究.pdf

维普资讯 一 78 ． s 动 物 学 研 究 1997，17 (1)：75—78 CN 53 1040／Q ISSN 0254 5853 ZoologicalResearch 草鱼垂体 STH 细胞组织化学和超微结构研究 懒{湖南农…业大学水产系 长沙沙 410128)) {湖南师范大学生物系 长沙 410006)／ 9 —7 ．·( 摘要 本文分别对草鱼性成熟前、后垂体 STH细胞(somatotropincells)进行了组 织化学和超微结构研究。垂体 STH 细胞多位于中腺垂体 中部和背部，为嗜酸性细胞， 用 PMB(PASMB)和 APG(AB PASOG)两种组织化学方_=击染色，对橙黄 G 阳性， 对 PAS、AB阴性 电镜下电子密度较高，内质网绕棱呈环形，分泌颗粒 多而小。 关键词 STH 细胞，组织化学结构，超微结构 ． 自朱作言 (1986)获得高等动物生长激素 “转基因鱼”以来，研制 “垒鱼式”鱼类生长激 素已成为热门研究领域。近年来，人们一直在寻求通 过增加鱼体 内生长激素 (growth hormone)含量促进鱼类生长的方法和途径 。方法之一是将外源 GH (哺乳类或鱼类)注 射、埋植入鱼体 内，另一途径是将外源生 长激素基因转移 到鱼基 因组 中 (陈松林 ， 1992)．但后者在水产养殖中推广应用可能存在一定困难 (陈松林，1992)。 由于鱼类 自身 的生长激素来源极为有 限，因此 ，通过鱼类脑垂体 STH 细胞 (somatotropince~s)单克隆 培育技术等细胞工程技术可研制、提纯较大量的鱼类生长激素。对 STH 细胞结构的研究 和辨识，是细胞工程技术研制鱼类生长激素的基础 ，可为研制 “垒鱼式 ”鱼类生长激素技术 提供可靠的细胞形态结构和生理活动依据等。对鱼类脑垂体 STH细胞结构的研究，许多 学者 曾作过报道，如 Nagahama(1970)、 Holmes(1974)~nBenjamins(1982)等，但对草 鱼脑垂体 STH细胞的结构研究国内外尚未见报道。本文就我国生长速度快的主要养殖优 良品种草鱼性成熟前、后脑垂体生长激素分泌细胞 (STH细胞)从组织化学和超微结构 水平上进行 了较为系统的研究 1 材料和 方法 实验于 1988-- 1989年进行 ，实验鱼取 自湖南湘阴东湖渔场水科队。 繁殖季节，选取性成熟草鱼一尾和未成熟 (2冬龄)草鱼数尾，立即解剖取出脑垂 体，将每个垂体 由前向后切成左右两半，立即进行固定，一半用Zenker液固定作组织切 片；另一半用 3％戊二醛固定，1％锇酸后固定，Epon812包埋剂包埋，进行超薄切 片， 切片厚 3×10 —5×10 ／tm，以醋酸双氧铀及柠檬酸铅双重染色，H600日本产透射 电镜 观察，并摄影。 本文 1994年 】2月 31日收到， 1995年 6月 1日修 回 维普资讯 76 动 物 学 研 究 17卷 脑垂体组织切片分别用下列方法染色 ：Wilson—Ezrrin高碘酸雪夫试剂—— 甲基蓝法 (PAS—MB，简 写 PMB，1954)和 R．F．Phifer阿利新 蓝 高碘 酸 雪夫试 剂—— 橙黄 G 法 (AB—PAS—OG)简写(APG，1971)，染色结果用Olympus显微镜观察，彩色摄影。 2 实验结果 五1 垂体 STH细胞 的组织化学结构 垂体 STH 细胞位于中腺垂体 中部和背部，细胞呈长形、椭园形或多角形，细胞核卵 圆形或多角形，细胞嗜酸性，进行 PMB、APG 染色，细胞对 PAS阴性，被橙黄 G染色 呈黄色，STH细胞常聚集夹杂于嗜碱性细胞之间，被 PMB、APG 染色呈桔黄色或橙黄 色 (细胞对橙黄 G阳性)，易于与碱性细胞区分。在性成熟前，草鱼脑垂体 STH细胞 占