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第二章 免疫组织化学的基本理论与技术 一、免疫组织化学的基本理论 1 原理：免疫组织化学(Immunohistochemistry) 是利用抗原与抗体特异性结合的原理，使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究。 可在光镜和电镜水平观察细胞膜及细胞内某种抗原物质的存在，从而为研究生命大分子，特别是酶、蛋白质、激素及受体蛋白等在组织内分布、细胞内定位以及代谢状态等，提供了特异性强、灵敏度高而又直观化的原位分析细胞组成物质的手段。 2 免疫组织化学全过程包括: ⑴ 抗原提取 ⑵ 抗体制备 (博士德,华美,基因公司等购买) ⑶ 抗体标记 ⑷ 免疫染色 ⑸ 观察分析等过程 二、抗原与抗体 1.抗原 Ag 定义：是指能刺激机体产生免疫应答，并与相应的免疫产物（抗体）发生特异性结合的物质。 蛋白质：免疫原性最强； 多糖：免疫原性次之； 脂类和核酸：必需和蛋白质及多糖形成复合物才具有良好的免疫原性。 2.抗体 Ab 定义：是机体受到抗原刺激后，由免疫细胞合成并分泌出 一类具有与抗原发生特异性结合的球蛋白。 存在部位：主要存在于血清内。 分类：根据重链的结构及抗原特异性不同分为五种， 即IgG、 IgD、Ig