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可见-紫外分光光度计PPT
紫外可见分光光度计
编辑制作:吴其宝
第二小组出版社出版
编辑指导:马方州
钓鱼岛是中国的 好好学习
紫外可见分光光度计工作原理
利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内,对于一个特定的波长,吸收的程度正比于试样中该成分的浓度,因此测量光谱可以进行定性分析,而且根据吸收与已知浓度的标样的比较,还能进行定量分析。
工作原理示意图
基本结构
主要由辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。
基本结构示意图
选择可见和紫外可见的分光光度计所关注的最关键的指标有三点:一是波长范围,二是波长准确度,三是杂散光参数。波长范围的选择是由用户实验需要所定,波长范围越宽的价格越贵;波长准确度及杂散光参数的数值越低,表示性能越好。
可见分光光度计常见的有721系列,722系列和723系列。 721系列可见分光光度计有721/721-100型,测定波长为360-800nm ,分为分指针和数显式两种方式的显示器。其中721-100型相对于721是型将测试样品室加宽,可用10cm的比色皿,为糖厂专用检测仪器。 722系列可见分光光度计有722/722S/722N型,测定波长为330-1000nm /325-1000nm。722型波长是330-1000nm,722S与722N的波长范围325-1000nm,其中722N是自动调节波长。 723系列可见分光光度计有723/723N/723PC /723PCS型四种,测定波长为320-1000nm,其中723是手动调整波长,723N是自动调波长,723PC配有扫描软件,723PCS带有扫描软件和打印机。 紫外可见分光光度计最常见的是UV752/UV752N,波长范围是195nm-1020nm。二者主要区别是UV752N可以选配打印机将数据输出,其中在杂散光参数,光谱带宽等方面还有细微的差别。
操作注意事项
仪器操作人员注意:1)比色皿架及比色皿在使用中的正确到位问题。有些使用者对这个问题不够重视,因操作不当造成偶然误差,严重影响分析结果。首先,应保证比色皿不倾斜放置。稍许倾斜,就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致,还可能使入射光不能全部通过样品池,导致测试比准确度不符合要求。其次,应保证每次测试时,比色皿架推拉到位。若不到位,将影响到测试值的重复性或准确度。最后,还应保证比色皿的清洁度,延长其使用寿命.2)干燥剂的使用问题。干燥剂失效将导致a)数显不稳、无法调“0”点或“100%”点(电路或光电管受潮)。b)反射镜发霉或沾污,影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因,分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。3)仪器的工作环境。应避免阳光直射、避免强电场、避免与较大功率的电器设备共电、避开腐蚀性气体等。
1. 检定物质
根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是最大吸收波长和摩尔吸收系数是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在国内外的药典中,已将众多的药物紫外吸收光谱的最大吸收波长和摩尔吸收系数载入其中,为药物分析提供了很好的手段。
紫外分光光度计的应用
2.与标准物及标准图谱对照
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确,精密度高,且测定条件要相同。
紫外可见分光光度计的应用
3. 比较最大吸收波长吸收系数的一致性
由于紫外吸收光谱只含有2~3个较宽的吸收带,而紫外光谱主要是分子内的发色团在紫外区产生的吸收,与分子和其它部分关系不大。具有相同发色团的不同分子结构,在较大分子中不影响发色团的紫外吸收光谱,不同的分子结构有可能有相同的紫外吸收光谱,但它们的吸收系数是有差别的。如果分析样品和标准样品的吸收波长相同,吸收系数也相同,则可认为分析样品与标准样品为同一物质。
紫外可见分光光度计的应用
纯度检验、推测化合物的分子结构、氢键强度的测定、络合物组成及稳定常数的测定、 反应动力学研究、 在有机分析中的应用等。紫外可见分光光度法仪器价格低廉适用性广泛,尤其是采用微机控制以来,该技术得到了突飞猛进的发展。近年来我国仪器制造厂可以生产出与国外等同水平的紫外分光光度计,成为分析者的最佳选择。
紫外可见分光光度计的应用
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赵国强
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