PCR仪凝胶成像仪使用说明.docVIP

ABI Veriti 梯度PCR仪使用说明(简版) 操作步骤： 打开PCR仪的热盖，放入0.2ml的样品管（热盖平稳），盖好热盖。 打开PCR仪的电源，仪器程序开始初始化，需等待几分钟（此步可提前）。 初始化完成后，显示主菜单。 点“Browse/New Methods”，进入PCR程序列表： 可以直接点一个PCR程序，选择“Start Run”运行；点右边的“文件夹”符号，可以选择不同的文件夹。如要新建一个PCR程序，点“New”，出现PCR程序。 添加一段程序：点上方的“Stage”，该位置变红；再点“Add”，软件将加入一段新的程序。 修改循环数、温度、时间：点中循环次数、温度或时间位置，下方出现数字键。依次点数字键，出现合适数字后，点“Done”确定。 8、增加一个步骤：点“Step”位置，该位置变红；再点“Add”，软件将加入一个新的步骤。 9、删除一个步骤：点“Step”位置，在点“Delete”，软件将该步骤删除。 建立梯度模式：点中一个步骤，再点“Option”键，出现选项。点“VeriFlex step”，出现梯度创建窗口：输入6个梯度温度，温度下方的“1－2”是指对应的1、2两行加热孔，全部输好后，点“Done”确定。注意：相邻的两个梯度温度之差最大不能超过5℃！ 11、建立渐变模式(如需要请参考使用说明详版)。 12、增加暂停步骤(如需要请参考使用说明详版)。 13、编辑PCR程序完成后，点“Save”保存。 14、回到PCR程序列表界面，选择新建的PCR程序。 15、点“Start Run”，设置参数（反应体积和热盖温度），点“Start Run Now”运行PCR程序。 16、仪器运行选中的PCR程序，显示运行监视窗口。 17、暂停运行：点“Pause Run”，仪器暂停，出现暂停选项栏。 18、终止运行：点“Stop”可以终止整个PCR程序。 19、反应报告：PCR程序结束后，仪器会自动生成反应报告，显示当次反应的各项指数。 20、反应结束后，打开热盖取出样品，关闭电源。并开盖放置，使热盖和加热模块正常降温。（使用说明详版在A605门口处吊柜中）。 A:运行状态栏，显示运行温度和剩余时间 B:加热警示标记 C:阶段指示 D:步骤温度 E:步骤时间 F:步骤指示 G:状态报告，显示日期、时间和仪器状态 H:延伸箭头，点箭头可以显示更多的步骤 请大家注意保持PCR仪的清洁，定期对PCR仪进行清理（两周一次）！ BioRad公司出品PCR仪?名字输入后，显示“STEP1 TEMP GOTO OPIT ON END”，按ENTER则可以输入温度（0～100 ℃），按ENTER确认后，则可以输入孵育时间，输入数字，完成后按ENTER确认，跳到下一步，输入方式同上。 ?选择GOTO，输入循环步骤时链接到第几步（循环数最多可达 9999次）（为实际循环数-1)。 ?选择option，显示“STEP EXTENDI NCREMENT SLOPE”再选择increment，按ENTER”确认，输入初始的温度，确认后输入时间，按“ENTER”确认，然后输入每个循环增加或减少的温度，增加用正值，减少用负值（-0.1 ℃～6℃），按“ENTER”确认。 ④选择extend，按“ENTER”确认，输入每个循环增加或减少的时间（-60 ～60秒），按“ENTER”确认。 ⑤选择slop（指温度上升或下降的速率），输入温度的改变值（-0.1 ～1.5℃）。按“ENTER”确认，然后输入加热或致冷的速度，按“ENTER”确认，选择End，输入结束步骤。 输入完成的程序后，到主菜单，选择新程序，开始运行。 其它：用“pause”可以暂停一个运行的程序，再按一次继续程序。用“stop”或“Cancel”可停止运行的程序。（注意：使用梯度PCR程序时，相邻的两个梯度温度之差最大不能超过5℃！） 两台BioRad公司的PCR仪的操作规范基本一致，请大家规范操作。 请大家注意保持PCR仪的清洁，定期对PCR仪进行清理（两周一次）！ PCR仪保养篇 1．样品池的清洗 先打开盖子，然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡样品池5min，然后清洗被污染的孔；用微量移液器吸取液体，用棉签吸干剩余液体；打开PCR仪，设定保持温度为50℃的PCR程序并使之运行，让残余液体挥发去除。一般5～10min即可。 2．热盖的清洗 对于荧光定量PCR仪，当有荧光污染出现，而且这一污染并非来自样品池时；或当有污染或残迹物影响到热盖的松紧时，需要用压缩空气或纯水清洗垫盖底面，确保样品池的孔镜干净，无污物阻挡光路。 3．仪器外表面的清洗 清洗仪器的外