PCR仪凝胶成像仪使用说明.docVIP

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ABI Veriti 梯度PCR仪使用说明(简版) 操作步骤: 打开PCR仪的热盖,放入0.2ml的样品管(热盖平稳),盖好热盖。 打开PCR仪的电源,仪器程序开始初始化,需等待几分钟(此步可提前)。 初始化完成后,显示主菜单。 点“Browse/New Methods”,进入PCR程序列表: 可以直接点一个PCR程序,选择“Start Run”运行;点右边的“文件夹”符号,可以选择不同的文件夹。如要新建一个PCR程序,点“New”,出现PCR程序。 添加一段程序:点上方的“Stage”,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一段新的程序。 修改循环数、温度、时间:点中循环次数、温度或时间位置,下方出现数字键。依次点数字键,出现合适数字后,点“Done”确定。 8、增加一个步骤:点“Step”位置,该位置变红;再点“Add”,软件将加入一个新的步骤。 9、删除一个步骤:点“Step”位置,在点“Delete”,软件将该步骤删除。 建立梯度模式:点中一个步骤,再点“Option”键,出现选项。点“VeriFlex step”,出现梯度创建窗口:输入6个梯度温度,温度下方的“1-2”是指对应的1、2两行加热孔,全部输好后,点“Done”确定。注意:相邻的两个梯度温度之差最大不能超过5℃! 11、建立渐变模式(如需要请参考使用说明详版)。 12、增加暂停步骤(如需要请参考使用说明详版)。 13、编辑PCR程序完成后,点“Save”保存。 14、回到PCR程序列表界面,选择新建的PCR程序。 15、点“Start Run”,设置参数(反应体积和热盖温度),点“Start Run Now”运行PCR程序。 16、仪器运行选中的PCR程序,显示运行监视窗口。 17、暂停运行:点“Pause Run”,仪器暂停,出现暂停选项栏。 18、终止运行:点“Stop”可以终止整个PCR程序。 19、反应报告:PCR程序结束后,仪器会自动生成反应报告,显示当次反应的各项指数。 20、反应结束后,打开热盖取出样品,关闭电源。并开盖放置,使热盖和加热模块正常降温。(使用说明详版在A605门口处吊柜中)。 A:运行状态栏,显示运行温度和剩余时间 B:加热警示标记 C:阶段指示 D:步骤温度 E:步骤时间 F:步骤指示 G:状态报告,显示日期、时间和仪器状态 H:延伸箭头,点箭头可以显示更多的步骤 请大家注意保持PCR仪的清洁,定期对PCR仪进行清理(两周一次)! BioRad公司出品PCR仪?名字输入后,显示“STEP1 TEMP GOTO OPIT ON END”,按ENTER则可以输入温度(0~100 ℃),按ENTER确认后,则可以输入孵育时间,输入数字,完成后按ENTER确认,跳到下一步,输入方式同上。 ?选择GOTO,输入循环步骤时链接到第几步(循环数最多可达 9999次)(为实际循环数-1)。 ?选择option,显示“STEP EXTENDI NCREMENT SLOPE”再选择increment,按ENTER”确认,输入初始的温度,确认后输入时间,按“ENTER”确认,然后输入每个循环增加或减少的温度,增加用正值,减少用负值(-0.1 ℃~6℃),按“ENTER”确认。 ④选择extend,按“ENTER”确认,输入每个循环增加或减少的时间(-60 ~60秒),按“ENTER”确认。 ⑤选择slop(指温度上升或下降的速率),输入温度的改变值(-0.1 ~1.5℃)。按“ENTER”确认,然后输入加热或致冷的速度,按“ENTER”确认,选择End,输入结束步骤。 输入完成的程序后,到主菜单,选择新程序,开始运行。 其它:用“pause”可以暂停一个运行的程序,再按一次继续程序。用“stop”或“Cancel”可停止运行的程序。(注意:使用梯度PCR程序时,相邻的两个梯度温度之差最大不能超过5℃!) 两台BioRad公司的PCR仪的操作规范基本一致,请大家规范操作。 请大家注意保持PCR仪的清洁,定期对PCR仪进行清理(两周一次)! PCR仪保养篇 1.样品池的清洗 先打开盖子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡样品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液体,用棉签吸干剩余液体;打开PCR仪,设定保持温度为50℃的PCR程序并使之运行,让残余液体挥发去除。一般5~10min即可。 2.热盖的清洗 对于荧光定量PCR仪,当有荧光污染出现,而且这一污染并非来自样品池时;或当有污染或残迹物影响到热盖的松紧时,需要用压缩空气或纯水清洗垫盖底面,确保样品池的孔镜干净,无污物阻挡光路。 3.仪器外表面的清洗 清洗仪器的外

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