紫外分光光度计使用方法和原理-新版..ppt

?紫外/可见分光光度计的使用原理和方法 紫外/可见分光光度法的特点 §1. 紫外/可见吸收光谱 1. 物质对光的选择性吸收 饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*，n→σ* 跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区，吸收峰低于200nm，实际应用价值不大。 不饱合机化合物的电子跃迁类型为n→π*，π→π* 跃迁，吸收峰一般大于200nm。 过渡金属的电子跃迁类型为d电子在不同d轨道间的跃迁，吸收紫外或可见光谱。这些峰强烈受配位环境的影响。 例如 cu2+以水为配位体，吸收峰在794nm处，而以氨为配位体，吸收峰在663nm处。此类光谱吸收强度弱，较少用于定量分析。 1.4 影响紫外/可见吸收光谱的因素 物质的吸收光谱与测定条件有密切的关系。测定条件（温度、溶剂极性、pH等）不同，吸收光谱的形状、吸收峰的位置、吸收强度等都可能发生变化。 1.温度 在室温范围内，温度对吸收光谱的影响不大。 1.5 紫外/可见吸收光谱的应用 紫外-可见吸收光谱除主要可用于物质的定量分析外，还可以用于物质的定性分析、纯度鉴定、结构分析。 1.定性分析 紫外吸收光谱定性分析是利用光谱吸收峰的数目、 峰位置、吸收强度等特征来进行物质的鉴定。 吸光度: 为透光度倒数的对数，用A表示， 即 A=lg1/T=lgI0/It 二、朗伯-比尔定律 朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即 A= κ cl 式中比例常数κ与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。 §3. 紫外/可见分光光度计 一、主要部件的性能与作用 基本结构: 光源→单色器→吸收池→检测器→信号显示系统 §4 分析条件的选择 一、 仪器测量条件的选择 1.适宜的吸光度范围 由朗伯-比尔定律可知： A=lg1/T=εcl 微分后得： dlgT=0.4343dT/T= -εldc 或 0.4343ΔT/T= -εlΔc 通常是根据被测组分的吸收光谱，选择最强吸收带的最大吸收波长为入射波长。当最强吸收峰的峰形比较尖锐时，往往选用吸收稍低，峰形稍平坦的次强峰或肩峰进行测定。 §7紫外/可见分光光度计使用领域 科研机构 国家质检机构对产品的质量检验、质量控制、进出口商品的检验检疫、科研院所 。 教学研究 应用于动力学研究、酸碱离解常数测定、光度滴定。 §7紫外/可见分光光度计使用领域 环境监测 按国家标准完成对水质、大气、降雨及土壤等的监测，测定其中各类污染的含量。 制造业 应用于工业生产的过程控制和有机合成中间体的分析、食品中的添加剂、防腐剂、香料分析以及食品中的脂肪、酶、糖类、矿物质、维生素等营养成分的含量测定，化妆品等。 §7紫外/可见分光光度计使用领域 石油化工 应用于石化生产中的过程中控、成品检验。 卫生防疫 医药卫生、临床分析、疾控分析、生命领域的微量样品测定、人体生化指标分析、代谢产物分析、药品分析。 地质勘查 应用于矿产中金属元素和无机盐的测定、海洋地质勘查、水文站等。 §7紫外/可见分光光度计使用领域 水质分析 应用于自来水厂、发电厂、污水处理厂。 农、林业 农药残留检测、作物成分检测、化肥检测、土壤成分检测、植物保护、植物检疫等。 牧、渔业 应用于兽药检测、饲料检测、动物疾病防治等。 二、紫外/可见分光光度计的类型 按其光学系统可分为单波长分光光度计和双波长分光光度计。 双波长分光光度计 双波长分光光度计的优点： 是可以在有背景干忧或共存组分吸收干扰的情况下对某组分进行定量测定。 三、分光光度计的校正和检验 1.波长校正 2.吸光度校正 3.杂散光的检验 4.稳定性的检验 代入朗伯-比尔定律有： Δc/c=0.4343ΔT/TlgT 要使测定的相对误差Δc/c最小，求导取极小得出： lgT=-0.4343=A 即当A=0.4343时，吸光度测量误差最小。 最适宜的测量范围为0.2~0.8之间。 2.入射光波长的选择 3．? 狭缝宽度的选择 为了选择合适的狭缝宽度，应以减少