性病的实验室检验与质量控制.ppt

性病的实验室检验与质量控制 人民医院检验科 一、什么是性病 性病—— 是一组传染性疾病， 通过性接触而传播的疾病。 我国重点防治的八种性病 梅毒、梅毒螺旋体 淋病、淋球菌 软下疳、杜克雷嗜血杆菌 性病性淋巴肉芽肿、衣原体 生殖道沙眼衣原体感染、沙眼衣原体 尖锐湿疣、乳头瘤病毒 生殖器疱疹、生殖器疱疹病毒 艾滋病 、HIV病毒 性病实验室在性病疫情监测中的任务 性病实验室在性病防治中的作用 主要常见性病实验室检测介绍 梅毒 淋病 生殖道沙眼衣原体 常用梅毒检测方法 病原学检测 血清学检测 病原学检测 原理：查找梅毒螺旋体 方法：暗视野显微镜检查、镀银染色法、直接荧光法、PCR 暗视野显微镜检查 制片：标本置于载玻片上，加一滴生理盐水，盖上盖玻片，在暗视野显微镜上油镜观察。 观察：由于光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出光亮。 梅毒螺旋体特征 螺旋整齐 折光性强 运动缓慢而有规律，有三种运动方式： 1.围绕其长轴旋转运动 2.伸缩其螺旋间距离移动 3.弯曲扭动如蛇形 病原学检查的临床意义 可以确诊为梅毒 及时治疗、预后、尽早切断传染源 注意：未找到梅毒螺旋体，不能排除患梅毒的可能性。 梅毒血清学检测 一、非梅毒螺旋体抗原血清学试验 二、梅毒螺旋体抗原血清学试验 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 1、原理：检测人体感染梅毒螺旋体产生的抗类脂抗原的抗体 2、方法： 性病研究实验室试验（VDRL） 不加热血清反应素试验（USR） 快速血浆反应素环状卡片试验（RPR） 甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） 梅毒螺旋体抗原血清试验 TPPA 性病实验室的质量控制 内部质量控制 外部质量控制 淋 病 常用淋病检测方法 直接显微镜检查 分离培养淋球菌 直接显微镜检查 原理：男性淋菌性尿道炎的分泌物中，多形核白细胞内可找到革兰染色阴性的双球菌。 直接显微镜检查的临床意义 男性淋菌性尿道炎的尿道标本 敏感性及特异性可高达95%～99%，具诊断价值。 宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时 敏感性仅40～70%。 不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌感染 不能用于疗后判愈 多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性双球菌，需做培养进行确证 淋球菌培养 1．原理：淋球菌在适宜的培养基上可生长出特征性的菌落，根据菌落大小、形态、光泽、边缘、颜色等情况，可以作为淋球菌的鉴定依据之一。 2、方法特点： 敏感性 81~100%。 特异性 100% 淋球菌培养 培养条件 ： 35 ℃ ～36℃，含5%～10% CO2，湿润（70%湿度）的环境。 CO2环境可由CO2培养箱、CO2产气袋及烛缸提供。使用烛缸时，应使用白色、无芳香味的无毒性蜡烛。在烛缸底部放些浸水棉球以保持一定的湿度。 培养时间：24~48小时 淋球菌的初步鉴定 初步鉴定淋球菌的依据 菌落特征 氧化酶试验 革兰染色 淋球菌培养的临床意义 生殖道沙眼衣原体感染 常用生殖道衣原体感染检测方法 抗原检测 酶联免疫吸附试验（ELISA） 免疫层析快速检测 核酸检测 酶联免疫吸附试验 原理：与衣原体特异性单克隆抗体形成抗原抗体复合物，通过酶联显色反应检测衣原体抗原。 方法特点 敏感性：79－97％ 特异性: 97－99％ 试验结果阴性时，不能完全排除沙眼衣原体感染，有可能是沙眼衣原体数量不足或标本采集不当的缘故 结果判读客观性强，适宜于大样本沙眼衣原体感染的检测。 在沙眼衣原体高流行率的人群临床和健康体检；低流行率（小于5%）的人群中应用时，结果解释应慎重。 酶联免疫吸附试验临床意义 抗原快速检测 原理：利用免疫层析法原理，采用胶体金标记的沙眼衣原体抗体滤纸条或卡，快速检测标本中的沙眼衣原体抗原。 方法特点 简易，方便，快速，尤其适用于基层单位 标本中需要足够数量的沙眼衣原体抗原，否则有假阴性结果 抗原快速检测临床意义 该方法主要适用于女性患者宫颈标本的检测，敏感性较低。 该法快速、简便，无需特殊仪器，因此，较适合基层实验室开展。 * * 疾病准确诊断 * 梅毒 * 淋病 * 沙眼衣原体感染 淋球菌耐药监测 实验室检测 专项性病患病率调查 实验室质量控制 临床服务 疫情监测 实验室诊断 效果评价 科学研究 RPR 定性试验 ?在纸卡圆圈中加入50μL待检血清，涂满整个圆圈 ?使用滴管和专用针头（60滴/mL），加1滴抗原悬液 ?旋转100rpm 8min ?立即判断结果 RPR 定量试验 待