突变型人胰高血糖素样肽-1对神经细胞损伤保护.PDF

·论 著 · 突变型人胰高血糖素样肽-1 对神经细胞损伤的保护 a a a b a a* 张蓝 ，孙中伟 ，黄刚 ，黄静 ，孟博 ，徐敏华 (华东师范大学，a.脑功能基因组学教育部重点实验室，上海市脑功能基因 组学重点实验室；b.生命科学学院，上海 200062) 摘要：目的 研究突变型人胰高血糖素样肽-1(mutated human glucagon-like peptide-1 ，mGLP-1)对谷氨酸诱导的人神经母 细胞瘤细胞SH-SY5Y 细胞损伤的影响。方法 环磷酸腺苷(cAMP)试剂盒检测细胞内 cAMP 含量，比较mGLP-1 和天然 人胰高血糖素样肽-1 (natural human glucagon-like peptide-1 ，nGLP-1)与GLP-1 受体结合的能力；以谷氨酸诱导SH-SY5Y 细胞损伤，同时用mGLP-1 处理SH-SY5Y 细胞，采用MTT 法检测细胞存活率；乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞LDH 的释放量；DAPI 染色法观察细胞凋亡形态学特征；钙流法检测胞内钙离子浓度变化；通过检测丙二醛(MDA)含量、超氧 化物歧化酶(SOD)活性、总谷胱甘肽(total GS)含量的变化判断细胞氧化损伤程度。结果 mGLP-1 与nGLP-1 类似，都能 提高细胞内cAMP 水平；mGLP-1 能缓解谷氨酸诱导的细胞损伤，增加细胞存活率，降低LDH 释放量；mGLP-1 对谷氨 酸导致的细胞内钙离子变化没有修复作用；mGLP-1 能抑制氧化损伤指标MDA 含量升高，促进抗氧化系统指标 SOD 活 性增强和total GS 含量增加。结论 mGLP-1 可导致细胞内cAMP 含量增加。mGLP-1 对谷氨酸所致神经细胞损伤具有保 护作用，这可能是 mGLP-1 通过对神经细胞的抗氧化损伤作用实现的，而不是改善谷氨酸导致的钙稳态失衡。mGLP-1 的保护作用与nGLP-1 类似，而mGLP-1 在体内稳定性更强，半衰期更长；提示mGLP-1 可能对相关神经退行性疾病的治 疗具有更佳的潜在价值。 关键词：谷氨酸中毒；突变型人胰高血糖素样肽-1 ；胞内钙离子；氧化损伤；神经母细胞瘤细胞 中图分类号：R965.1 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2012)03-0185-07 Mutated Recombinant Human Glucagon-like Peptide-1 Protects SH-SY5Y Cells from Apoptosis Induced by Glutamate a a a b a a* ZHANG Lan , SUN Zhongwei , HUANG Gang , HUANG Jing , MENG Bo , XU Minhua (East China Normal University, a.Key Laboratory of Brain Functional Genomics, Ministry of Education, Shanghai Key Laboratory of Brain Functional Genomics; b.School of Life Science, Shanghai 200062, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To investigate the effects of mutated recombinant human glucagon-like peptide-1(mGLP-1) on glutamate-induced SH-SY5Y cell apoptosis. METHODS A cyclic adenosine monophosphate (cAMP) kit was selected for assaying intracellular c