猪肉生产链细菌耐药性及其耐药基因调查研究吴艺影.pdfVIP

科技与实践 ·ScienceandPractice 2015年第51卷第6期 猪肉生产链细菌耐药性及其耐药基因 调查研究 吴艺影，曲道峰，韩剑众* （ 浙江工商大学食品与生物工程学院，浙江杭州 310018） 摘 要：本试验旨在研究猪肉生产链中常见细菌的耐药性、耐药基因及其传递性。以养殖场、屠宰场、农贸市场的 环境及猪肉中常见细菌（大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌）为对象，利用药敏纸片 法检测细菌对常用的5 大类 17 种抗生素的耐药性，用PCR 鉴定9 种耐药基因的存在。研究发现，生产链中分离 的细菌对5 类 17 种常见抗生素均产生了不同程度的耐药性，其中对苯唑西林、四环素、甲氧苄啶等耐药性较高， 对丁胺卡那霉素耐药性最低。9 种耐药基因均有检出，blaTEM 、aac6- Ⅰb 、tetB 、tetC 的检出率较高，与药敏试验的 结果基本一致。耐药基因检出率屠宰加工厂养殖场农贸市场，耐药株可能具有传递性，为进一步研究打下基 础。因此，猪肉生产链中存在致病菌甚至一些非致病菌株对常用抗生素耐药的污染和威胁，需定期加强调查监 测，科学使用抗生素，防止耐药菌株的传播。 关键词：生产链；耐药性；耐药基因；传递 中图分类号：TS251.7 文献标识码：A 抗生素作为一种生长促进剂，可治疗和预防疾 贸市场内外环境中微生物的种类和含量是环境质量 病，在畜牧业中广泛使用[ 1] 。在中国，每年有超过 的重要指征，直接关系到动物健康和动物性食品的 8 000 t 的抗生素作为饲料添加剂被使用[2] 。滥用抗 质量安全，更关系到生态环境和人类健康[4-6] 。本研 生素会使致病菌产生耐药性，耐药基因（Antibiotic 究选择了浙江省内的规模养猪场、肉品屠宰加工厂 Resistance Genes ，ARGs）的存在是细菌耐药性产生 及相应的肉品销售农贸市场，对细菌耐药性及其耐 的根源。研究表明，抗生素摄入后除少部分残留在 药基因进行相关研究，从而揭示猪肉规模化生产中 体内，85% 以上以原药和代谢产物的形式经由粪尿 的细菌耐药表型、耐药基因型状况以及分子流行病 排出体外，进入生态环境，诱发和传播各类抗生素耐 学的规律，为生猪养殖合理用药、控制细菌耐药性发 药致病菌[3] 。猪肉生产要经历养殖、屠宰加工、贮存 展提供依据，从源头上控制肉制品安全，减少对生态 运输、销售等多个环节，而养殖场、屠宰加工厂、农 环境的污染，保证人类的健康安全。 基金项目：浙江省重大科技专项（2008C12078） 1 材料与方法 作者简介：吴艺影（1991—），女，浙江人，硕士，主要从事食品质 量与安全研究，Email: virginia_111@126.com 1.1 样品采集与处理 * 通讯作者：韩剑众（1963—），男，浙江人，教授，研究方向为肉 品品质与安全控制，Email: hanjz99@ 每次采样，将养猪场中的猪进行标号，生猪体 78 2015年第51卷第6期 Sci enceandPractice· 技与实践 科 表、胴体、生鲜猪肉样品严格按照编号一一对应，以 XP 扩增仪购自杭州博日科技有限公司，DYY-2C 型 保证在生产链每个环节的可追溯性。从浙江省内2 电泳仪购自北京市六一仪器厂，ChemiDoc XRS+ 蛋 家大型养猪场、1 家屠宰场、