(2)标准对照法 (比较法) 若试样中只有被测组分在λmax处有吸收,且符合朗伯-比耳定律,则配制一与待测样品浓度接近的标准溶液,在相同条件下显色,在同一波长处测定吸光度,根据下式可计算出待测样品的浓度。 A样=εbc样 A标=εbc标 在1cm比色皿和525nm时,1.00×10-4mol/LKMnO4溶液吸光度为0.585。现有0.5g锰合金试样,溶于酸后,用高碘酸盐将锰全部氧化成MnO4-。然后移至500mL容量瓶中。在1cm比色皿和525nm时,测得吸光度为0.400。求试样中锰的百分含量(Mn:54.94)。 2、多组分同时测定 当溶液存在两种或两种以上待测组分时,用分光光度法可同时测定。若溶液中存在两种组分X和Y,它们的吸收光谱一般可有如下两种情况。 ① 吸收光谱不重叠。吸收光谱不重叠或至少能找到在波长λ1 时X有吸收而Y不吸收,在波长λ2 时Y有吸收而X不吸收,如图所示,此时可在波长λ1处测定X的含量,可在波长λ2处测定y的含量,相互不干扰。 ② 吸收光谱重叠 当组分x和组分y的吸收光谱重叠时,如图所示。可选定两组分吸光度相差较大的波长λ1和λ2,测定吸光度。若各组分的吸光性能符合比耳定律,则其总吸光度为各组分吸光度之和(吸光度加合性),在波长λ1 和λ2处测定吸收度A1 和A2,可得到如下联立方程:
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