第八章环境工程微生物学-微生物的遗传和变异3.ppt

微生物的遗传变异与环境工程 微生物的遗传与环境工程(重点) 微生物的变异 基因重组 遗传工程技术在环保中的应用(重点) 微生物的遗传 遗传和变异是一切生物最本质的属性。是指亲代如何如将自身的遗传基因稳定地传递给下一代的特性。 遗传（保守性/相对性） 变异（绝对性）——育种/废水（气、固废）降解菌的筛选 遗传和变异——进化 遗传学：研究生物遗传和变异现象的学科。 微生物的遗传 遗传和变异的物质基础－－DNA DNA的结构与复制 DNA的变性和复性 RNA的类型和结构 蛋白质的合成 微生物的遗传 1、遗传和变异的物质基础—核酸（DNA，RNA） 三个经典实验 植物病毒的重建实验 为了证明核酸是遗传物质，H. Fraenkel-Conrat（1956）用含RNA的烟草花叶病毒（TMV）进行了著名的植物病毒重建实验。 将TMV在一定浓度的苯酚溶液中振荡，就能将其蛋白质外壳与RNA核心相分离。分离后的RNA在没有蛋白质包裹的情况下，也能感染烟草并使其患典型症状，而且在病斑中还能分离出正常病毒粒子。 核苷酸的结构 DNA分子结构，是通过3’,5’-磷酸二酯键连接形成线性或环形多聚体。由于组成DNA的核苷酸彼此之间的差别仅在于碱基部分，所以DNA的化学结构即指DNA分子中碱基的组成和排列顺序。 2、DNA的模型 1.DNA分子是由两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕构成的，两条线都是右手螺旋。 2.磷酸与核糖在外侧，通过3’,5’-磷酸二酯键线连接形成DNA分子骨架，嘌呤碱基与嘧啶碱基位于双螺旋的内侧。 3.双螺旋的平均直径为2 nm，两个临近的碱基对之间距离为0.34 nm，沿中心轴每旋转一周有10个核苷酸，因此，每一转的高度为3.4 nm。 4.两条核苷酸链通过碱基之间的氢键相连。 （三）RNA的类型与功能 RNA的化学结构主要是由AMP、GMP、CMP和UMP四种核糖核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键相连而成的多聚和苷酸链。天然RNA的二级结构只在许多区段发生自身回折，使部分A-U，G-C碱基配对，形成短的、不规则的螺旋区。不配对的碱基区膨出形成环，被排斥在双螺旋之外。 RNA的分类 核糖体RNA（r RNA ）、信使RNA（mRNA ）和转移RNA （ tRNA ）反义RNA（asRNA)。 （三）RNA的类型与功能 二、DNA的复制与蛋白质的合成 （一）DNA的复制-自我复制 1、DNA的半保留复制 DNA具有独特的半保留式的自我复制能力，确保了DNA复制精确，并保证一切生物遗传性的相对稳定。 2. DNA的复制过程 1）DNA复制的起始 （1）DNA复制的起始点 DNA复制开始于染色体上的特定部位，成为起始点。在起始点处双股螺旋解开成单链状态，各自作为模板按照互补配对原则吸引带有互补碱基的核苷酸，合成其互补链。在起始点处出现叉子状的生长点，成为复制叉。 (2) DNA复制的方向 复制的方向有三种：一是从两个起点开始，各以相反的单一方向生长出一条新链，形成两个复制叉；二是从一个起始点开始，以同一方向生出两条链，形成一个复制叉；三是从一个起点开始，沿两个相反的方向各生长出两条链，形成两个复制叉。 2. DNA的复制过程 （3）RNA引物的合成。 DNA聚合酶只能催化链的延长不能发动新链合成，即它需要一个具3’-OH的核酸链作为引物，才能将合成原料dNTP一个个接上去。RNA引物酶则不同，此酶以DNA为模板就可以合成一段新的RNA，这段RNA作为合成DNA的引物。DNA聚合酶从该引物3’-OH端开始合成新的DNA链。 2）DNA复制的延长和终止 所有已知DNA聚合酶都只是能催化5’ 3’方向的合成 二、DNA的复制与蛋白质的合成 中心法则是指遗传信息从DNA传递到RNA，再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译过程。遗传信息也可以从DNA传递给DNA，即完成DNA的复制过程。这是所有具有细胞结构的生物所遵循的法则。 从遗传密码表中可看出： 密码子共64种。其中二个起始密码（AUG、GUG）；三个终止密码（UAA、UAG、UGA）不决定任何氨基酸。 一种密码子只对应一种氨基酸，但一种氨基酸可以和多种密码子相对应。 DNA的变性： 解链温度Tm： DNA的复性： DNA的变性 DNA复性 四、分子生物学技术及其在环境工程中的应用 目前，用于环境工程的分子生物学技术的基因序列主要有3种 1).编码蛋白的基因序列。主要 包括污染物的降解基因以及和微生物分类有关的基因。 2).rRNA基因序列。原核微生物的分类对16S rRNA研究最多。 3）16S-23SrRNA基因转录间隔区。 （一）.常用的分子生物学技术 聚合酶