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北 京 澳 作 生 态 仪 器 有 限 公 司 Instrumentation Consultancy Technologies 公司地址：北京市海淀区中关村东路 89 号恒兴大厦 24G （100190） OS5p 调制叶绿素荧光仪 操作手册 澳 作 生 态 仪 器 有 限 公 司 Beijing Aozuo Ecology Instrumentation Ltd. 网站： Email: sales@. cn support@ 电话：(010) 传真：(010) 北 京 澳 作 生 态 仪 器 有 限 公 司 Instrumentation Consultancy Technologies 公司地址：北京市海淀区中关村东路 89 号恒兴大厦 24G （100190） 使用仪器前，请仔细阅读本说明书 调制型叶绿素荧光仪基础知识 叶绿素荧光 绿色植物细胞内的叶绿素分子吸收光量子得到能量后，从基态（低能态）跃迁到激发态（高能态）。 由于光的波长越短能量越高，故叶绿素分子吸收红光后，电子跃迁到较低激发态；吸收蓝光后，电子跃 -15 s ） 迁到更高的能级（较高激发态）。处于较高激发态的叶绿素分子很不稳定，在几百飞秒（fs，1 fs=10 内，就会向周围环境辐射热量，回到较低激发态。较低激发态的叶绿素分子可以稳定存在几纳秒（ns ，1 ns=10-9 s ）。 处于较低激发态的叶绿素分子又可以通过几种途径释放能量回到稳定的基态。能量的释放方式有 3 种：1）重新放出一个光子，回到基态，即产生荧光。由于部分能量在放出荧光光子之前就已经以热的 形式逸散掉了，因此荧光的波长比吸收光的波长要长，叶绿素荧光一般位于红光区。2 ）不放出光子， 直接以热的形式耗散掉（非辐射能量耗散）。3 ）将能量从一个叶绿素分子传递到邻近的另一个叶绿素分 子，能量在一系列叶绿素分子之间传递，最后到达反应中心，反应中心叶绿素分子通过电荷分离将能量 传递给电子受体，从而进行光化学反应。以上这 3 个过程是相互竞争的，往往是具有最大速率的过程处 于支配地位。对许多色素分子来说，荧光发生在纳秒级，而光化学发生在皮秒级，因此当光合生物处于 正常的生理状态时，色素吸收的光能绝大部分用来进行光化学反应，只有约 3%～5%的能量用于产生荧 光。 OS5p 调制叶绿素荧光仪 OS5p 是调制型叶绿素荧光仪，所谓调制技术，就是说用于激发荧光的测量光 measuring light (调制 光 modulation light)具有一定的调制（开/关）频率，检测器只记录与测量光同频的荧光，因此调制荧光 仪允许测量所有生理状态下的荧光，消除了背景光的影响。正是由于调制技术的出现，才使得叶绿素荧 光由传统的“黑匣子”测量（避免环境光的黑暗测量）走向了野外环境光下测量，叶绿素荧光的研究由 生理学走向了生态学。 所谓饱和脉冲技术，就是打开一个持续时间很短（一般小于 1 s）的强光，使所有的电子受体都处于 关闭状态（光合作用被暂时抑制），从而使叶绿素荧光达到最大。饱和脉冲（Saturation Pulse, SP）可被 看作是光化光（actinic light ）的一个特例。光化光越强，PS II 释放的电子越多，PQ 处累积的电子越多， 也就是说关闭态的电子受体越多，F 越高。当光化光达到使所有的电子受体都关闭（不能进行光合作用） 的强度时，就称之为