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免疫学实验中心 免疫学实验中心 流式细胞术的样品制备 凡是能被荧光素标记的且这种荧光素能被流式细胞仪所配置的激光光源激发的细胞或颗粒，都可用流式细胞仪检测。在生物检测技术中流式细胞仪是不可多得的一机多用的仪器。 流式参与研究的学科种类 应用流式发表的论文统计 流式细胞仪的特点 单个细胞分析 同时多参数分析 速度快：10000个细胞/秒 统计学意义：提供细胞群体的均值和分布情况 分选感兴趣的细胞 流式细胞仪的散射光信号 流式细胞仪的散射光信号 FSC:表示细胞大小 SSC:表示细胞内颗粒的复杂程度 荧光信号 荧光素吸收激光能量 荧光素将吸收能量释放，转换为 振动能和热能 释放较入射光波长更长的光量子 荧光素与特异抗体结合 荧光抗体与细胞抗原结合越多，产生的荧光信号越强 荧光染料的特性 荧光素的选择 3. 抗原丰富度决定荧光素的选择 高密度表达的抗原我们可以应用任何荧光素标记的抗体来检测，低密度表达的抗原就需要我们应用高信噪比高的荧光素 例如：细胞表面的CD3 细胞产生的IFN-? 可以用任何荧 光素标记的抗体 而IL-4则最好用APC等高信噪比的荧光素标记的抗体 抗体的选择 首选直接标记抗体 荧光分子 PE最强，适用于弱表达抗原 FITC最便宜，适用于强表达抗原 间接