生化反应曲线.ppt

* 1st entry: 方法类型 2nd entry: 总分析时间 3rd - 6th entry: 测量点 一点终点法应用参数（1 Point Endpoint assay） Utility - Application - Analyze TRIGL CHO 一点终点法分析项目举例 Endpoint assays 例如,多项同测组合试剂盒,CHO与TG同一测定 即双终点法,在一个通道内一次进行两项反应相关的终点法测定. 　三点终点法 上升 increasing 或 下降decreasing 终点法反应的方向（Reaction Direction） 速率法  吸光度 t t2 t1 t3 t4 △A1 △A2 △A3 S+R 时间 A 1 利用线性反应期，计算出单位时间的吸光度变化△A/min，来计算酶的活性。 单位时间的吸光度变化量是一致的 在酶促反应过程中,在反应速度恒定期(线性反应期)来连续观察和记录一定 反应时间内底物或代谢产物变化速度的化学方法. 速率A法 （Rate A） 两点速率法（2-point Rate）  速率法（Endpoint assays） 速率A法 A 单试剂速率法 例如:ACP\AFU 　　　 B 双试剂速率法 例如:ALT\AST\CK… 在较长的反应时间区段内,每隔一定时间读取一次吸光度值,至少读取4点,得到3个△A,求出单位时间的反应速率 △A/min . 通过最小二乘法（least squares method） Rate A assay – Modular P Reag. at R3 timing Last mp 1st. mp Sample Reag. at R1 timing Rate assays GOT/AST GGT GPT/ ALT Lipase ALP GLDH Amylase LDH CHE CKMB 速率A 法-分析项目举例 Enzymes Rate assays 2点速率法 2点速率法 尿素氮 指在时间-吸光度曲线上选择两个测光点，此两点既非反应初始吸光度亦 非终点吸光度，这两点的单位时间吸光度差值用于结果计算。 2-point Rate assay Rate assays C + D (product) + B1 (reagent 1) + B2 (reagent 2) A (sample) Enzyme 采用一种或多种试剂 检测两个测量点检测固定的间隔时间内两点的吸光度变化。 换算成? Abs/min参与计算 在加入最后最后一个试剂之后进行吸光度检测。 两点速率法的特点2-point Rate assay Rate assays 2-point Rate assay – Modular P Rate assays Ammonia Acid phosphatase Non-prostatic phosphatase Urinary/CSF protein Bicarbonate Urea Rate assays 2点速率 法-分析项目举例 Reaction Direction 上升decreasing 或 下降increasing 生化反应曲线 Thank you for your attention Roche Diagnostics (Shanghai) Limited Shanghai 200031 China This presentation is our intellectual property. Without our written consent, it shall neither be copied in any manner, nor used for manufacturing, nor communicated to third parties. COBAS and LIFE NEEDS ANSWERS are trademarks of Roche * * Basic Technology Training Basic Chemistry Chemistry C-A Mitchell Feb 2007 BTT v.2 January 2008 * Basic Technology Training Basic Chemistry Chemistry