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坤舒康颗粒抗大鼠棉球肉芽肿形成及其作用机制,计算胸腺、脾脏指数;股动脉取血,分别检测血浆6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、血栓烷B2(TXB2)及血清白介素-1β(IL-1β)、一氧化氮(NO)水平。 结果 与假手术组比较,模型组大鼠的胸腺及脾脏指数明显降低(P 0.05),坤舒康颗粒高剂量、中剂量组大鼠血浆6-keto-PGF1α、TXB2及血清IL-1β、NO水平均明显降低(P [Key words] Kunshukang Granules; Cotton ball granuloma; 6-keto-PGF1α; TXB2; IL-1β; NO
坤舒康颗粒为石家庄第四医院制剂,是河北省新版农合药品目录品种。本品主要由丹参、蒲公英、赤芍等药组成,具有清热利湿、解毒活血、化瘀止痛功效,主要用于腹痛带下、症瘕积聚、小腹胀满疼痛等病症的治疗[1]。本品在临床应用多年,显示其对慢性盆腔炎的治疗效果显著,但其作用机制不明[2]。本研究通过建立大鼠棉球肉芽肿慢性炎症模型,观察坤舒康颗粒的抗炎作用,并初步探讨其作用机制
1 材料与方法
1.1 实验动物
SD大鼠,清洁级,雌性,体重180~200 g,由河北医科大学实验动物中心提供,实验动物使用许可证号SYXK(冀)2011-0047,动物合格证号1509046。动物在河北中医学院中药药理实验室分笼饲养,恒温恒湿,普通饲料,自由饮水
1.2 药物与试剂
坤舒康颗粒(石家庄第四医院,批。取200 g坤舒康颗粒,加0.5% CMC-Na混匀,定容至100 mL,即得坤舒康颗粒高剂量混悬液(2 g/mL);将坤舒康颗粒高剂量混悬液稀释1/2,即得坤舒康颗粒中剂量混悬液(1 g/mL);将坤舒康颗粒中剂量混悬液稀释1/2,即得坤舒康颗粒低剂量混悬液(0.5 g/mL)。庆大霉素注射液(8万U,河南润弘制药股份有限公司,批号1506172)。醋酸地塞米松(0.75 mg,天津天药药业股份有限公司,批号150114)。将醋酸地塞米松片研碎,精密称取800 mg,加0.5% CMC-Na混匀,定容至100 mL。血栓烷B2(TXB2)放射免疫分析药盒(北京普尔伟业生物科技有限公司),6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)放射免疫分析药盒(北京普尔伟业生物科技有限公司),白介素-1β(IL-1β)放射免疫分析药盒(北京普尔伟业生物科技有限公司),一氧化氮(NO)分析试剂盒(南京建成生物工程研究所)
1.3 实验器材
ML204分析天平(瑞士Mettler toledogo公司),DHG-9023A电热恒温鼓风干燥箱(上海合恒仪器设备有限公司),5417R型离心机(德国Eppendorf公司),756MC型紫外-可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司),全自动γ放免分析仪(北京金泉水科技有限公司)等
1.4 模型建立、分组给药
将60只大鼠随机分成6组,分别为坤舒康颗粒高剂量组(20 g/kg体重)、中剂量组(10 g/kg体重)、低剂量组(5 g/kg体重),阳性药地塞米松组(阳性组)(0.08 g/kg体重),模型组,假手术组,每组10只。除假手术组外,其余各组大鼠以10%水合氯醛麻醉后,于左前肢腋下近背部位置以碘酒消毒,切开1 cm长小口。取灭菌棉球约20 mg,另加庆大霉素1 mL,从小切口植入皮下,随即缝合皮肤,建造慢性炎症模型。假手术组大鼠仅施以手术操作,但不植入棉球。从手术当日开始,各组大鼠灌胃给药或蒸馏水,容量为10 mL/kg体重,连续14 d。剖开胸腔、腹腔,采集胸腺、脾脏,腹主动脉取血,用于指标的检测
1.5 指标检测
1.5.1 称取肉芽干重 末次给药后禁食12 h,对大鼠进行麻醉,打开大鼠原手术切口,将棉球同周围结缔组织一起取出,剔除脂肪组织,放置于60℃干燥箱中烘干12 h,称重。将称得的重量减去棉球重量即得肉芽干重
1.5.2 计算胸腺指数和脾脏指数 迅速剖开大鼠腹腔和胸腔,切取胸腺和脾脏,称重,并计算与体重之比,为胸腺指数和脾脏指数
1.5.3 检测血液生化指标 大鼠股动脉取血5~10 mL,置于放有0.1 mL 1%肝素生理盐水溶液的试管中,制备血浆,检测6-keto-PGF1α及TXB2含量;另取股动脉血,置于离心管中,静置,待血液凝固后,将其离心分离血清(3000 r/min,10 min),小心吸出上清,检测白介素1β(IL-1β)及一氧化氮(NO)含量
1.6 统计学方法
采用SPSS 19.0统计软件对数据进行分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示。各组间采用单因素方差分析,均数间两两比较采用LSD-t检验。以P 0
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