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基层动物抗体监测采样注意事项 　　摘要：对基层动物抗体监测采样注意事项进行了介绍，包括采血前的准备，采样的时效性，采样操作方法，采样样品的质与量分析，样品的标记，样品的保存与运送及样品生物安全防范措施等 关键词：动物抗体监测；采样；注意事项 中图分类号：S851 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2016）10-0029-02 抗体监测是对免疫工作的一个检验，标志着免疫工作的成败，也是指导养殖场（户）制定科学合理的免疫程序的一个重要依据，是动物疫病防控的基础和关键，而高质量有代表性的样品是抗体监测的基础。乡镇（街道）农业综合服务中心技术员直接承担着动物样品采集的任务。本文对采血前的准备，采样的时效性，采样操作方法，采样样品的质与量分析，样品的标记以及样品的保存与运送和样品生物安全防范措施等整个流程进行了详细的介绍，希望给养殖场（户）制定科学合理的免疫程序提供依据 1 采样前准备 （1）器械样品采集前应准备好采血器、镊子、酒精棉、碘酒棉、注射器及针头等。注意采样器具和样品容器须无菌 （2）记录用品。标签、签字笔、记号笔、采样单、采样登记表等 （3）人员防护用具。口罩、防护镜、一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、胶靴等 2 采样的时效性 在做抗体检测时，样品采集时间与免疫日期须有规定的间隔。疫苗接种畜禽后，在畜禽体内产生抗体并达到稳定水平需要时间和过程。一般情况下，新城疫、禽流感、猪瘟、口蹄疫等疫苗在免疫21 d后采集样品，猪繁殖与呼吸综合征疫苗在免疫28 d后采集样品 3 采样操作方法 （1）采样的消毒。采血前用75%乙醇局部螺旋消毒，以避免因采血而引起局部感染或污染样品。对于采血后容易形成血肿的畜禽，采血完毕要及时做好止血工作，即用干棉球轻压采血部位，防止血流过多 （2）采血方法。根据采样对象、目的、数量选择合适的方法。作免疫抗体监测采血，猪可选耳缘静脉采血；牛、羊等大家畜可选用颈静脉采血或心脏采血，家禽采血常用翅静脉采血。心脏采血多用于实验室培养基制备等时的无菌采血 4 样品的质与量 （1）高质量样品采集的前提。乡镇农业综合服务中心采血目的多用于疫苗注射后的抗体效价监测，采血前选择适当的部位、对采血部位消毒、按照样品采集方法严格无菌操作等是保证获得高质量血清的前提 （2）样品的放置与分离。血液在室温下倾斜放置2～4 h（防止暴晒），放入加有冰袋的保温箱中24 h内（长时间会有溶血现象）带到实验室，待血液凝固有血清自然析出后，经1 500～2 000 r/min离心5 min，分离血清 （3）样品的量。在基层采集样品主要是为了做抗体效价的监测，一份血清有可能做几种病的抗体效价检测，另外，有的很可能需要复查，所以血样的量一定要保证。一般情况下，群体采集量为存栏量的10%左右，个体采集如猪、鸡等的采血量每头（羽）不少于3 mL，保证血清分离量不少于1 mL （4）样品的质。抽样检测的结果代表的是整群，从样品的抗体合格率来反应整群的抗体合格率。在同群中要进行随机采样，不要挑着采，更不要一份样品分为多份样品，会导致样品不能代表整群，监测结果就没有意义 5 对样品的标记 （1）试管的标记。采血完毕，立即用标记笔在盛有样品的试管写上标记，并与采样畜禽对应，同时填写采样单一式三份，并随样品送实验室 （2）采样单的填写。采样单是对采样群基本情况的一个简要记录，一定要认真填写。因疫苗在畜禽体内产生的抗体有一个消长规律，根据免疫和采样时间来推测畜禽应该达到的抗体水平，根据抗体检测结果分析，可以更好指导区域内养殖业，降低养殖成本 6 样品的保存与运送 （1）保存。一般情况下，血液样品分离血清后移到EP管中，盖紧盖子防漏，封口，标记、整理、归类保存。分离后的血清24 h内监测可冷藏保存，若需长时间保存则将血清置-20 ℃以下保存，但要尽量避免反复冻融 （2）运送所采集的样品。以最快最直接的途径送往实验室，能在采集后24 h内送抵实验室，则可放在4 ℃左右的容器中运送。若在24 h内不能将样品送往实验室，可在血清中加入青霉素、链霉素防腐败。并在不致影响检验结果的情况下才可把?悠防涠常?并以此状态运送。根据试验需要决定送往实验室的样品是否放在保存液中运送 7 生物安全 （1）人员安全。一是采血人员、保定人员要做好个人防护工作，穿戴好防护用品，严格消毒，严防人畜共患病的发生；二是要做好采样、检测过程中的废弃物处理、无害化处理等，保护环境安全，否则都可能引起散毒 （2）畜禽安全。要做好大家畜的保定工作，防止踢伤、咬伤等意外事故的发生。采集血样时应先采集规模养殖户，后采集散养户，防止畜禽疾病的传播 8 小结 抗体监测