04微生物的实培养.pptVIP

一、微生物基础知识 2、菌落 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 常见的选择培养基 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。 在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落。 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 菌种的保存 1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2、长期保存：甘油冷冻管藏法 * * 专题2 :微生物的培养与应用 了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。 一、课题目标： 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。 无菌技术的操作。 二、课题重点和难点： 三、技能目标： 特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. 微生物 植物界 动物界 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 霉菌 酵母菌 食用菌 细菌 蓝藻 放线菌 支原体 衣原体 列克次体 生物 1、微生物 菌落 细菌的菌落特征因种而异 二、培养基 培养基是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料 。 不同的微生物所使用的培养基成分是不尽相同的。 1.培养基含义 2.培养基的成分 水分： 无机盐： 碳源： 有机碳（糖等）无机碳（CO2、CO32-等） 提供C元素，有机碳也能提供能量 氮源： 有机氮（蛋白质等）无机氮（N2 、NO2- 、NO3-、NH4+等） 有机氮（蛋白质等）无机氮（N2 、NO2- 、NO3-、NH4+等） 提供N元素，有机氮还能提供C元素、且能提供能量 生长因子： 微生物生长所必须的，自身又不能合成的有机小分子物质。 氨基酸、核苷酸、维生素、碱基等。 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。 （2）按功能来分：可分为选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分来分：可分为天然培养基和合成培养基。 3.培养基的种类 液体培养基：主要用于工业生产 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 半固体培养基：观察微生物的运动 无运动 有运动(弥散) 固体培养基：主要用于微生物分离、鉴定、计数和保藏 加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物 根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。 优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低 缺点： 缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。 合成培养基: 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：营养成分丰富，培养效果好 缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染; 天然培养基： 三、无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。无论是倒平板、平板划线操作，还是稀释涂布平板法，其操作中的每一步都需要做到“无菌”，即防止杂菌污染。主要包括以下几个方面：（教材P15） 只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。 　　利用较温和的化学或物理方法，杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）的过程。 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 (2)灭菌的定义 用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和