基因表达调控2摘要.pptVIP

一、真核细胞基因克隆载体 可以在两种截然不同的生物细胞中复制的载体称为穿梭载体（shuttle vector）。 穿梭载体在基因工程中广泛使用。 特 点： 着丝粒载体 YCp (yeast centromere plasmid) 1.3 酵母表达系统的特点 （2）缺点 表达外源基因的宿主菌主要包括啤酒酵母、巴斯德毕赤酵母、乳酸克努维酵母和多型汉森酵母 （2）表达分泌型蛋白 信号肽的切割： ②表达载体（整合型）构建： 整合到染色体中 （2）牛溶菌酶C2在嗜甲醇酵母中的表达 一、真核细胞基因克隆载体 （1）Ti质粒的结构 ①T-DNA（transfer-DNA） ②毒性基因（vir） ③冠瘿碱代谢基因 （2） Ti质粒转化的对象 （4） 天然Ti质粒作载体的缺点 （5） Ti质粒的改造 改造后的Ti质粒载体模式 （6） Ti载体的类型 pGV3850的特点： 选择标记 外源基因插入pGV3850的过程——同源重组 表达过程 转化后可诱导愈伤组织分化成转基因植物 ②双元载体（binary vectors） 所以，删除Vir就需要有一个帮助质粒 双元载体的转化 ③三亲融合法(triparental mating) 一、真核细胞基因克隆载体 ①SV40病毒的结构 ②SV40感染和生存方式 ③ SV40 DNA的复制 ④ SV40病毒的转录和翻译 ⑤ SV40病毒的整合