2007-2008年第1学期食品生物技术答案要点.docVIP

2007-2008学年第1学期食品生物技术 期末考试参考答案要点 一、名词解释（每题5分） 1、质粒：生物细胞内固有的、能独立于寄主染色体之外自我复制、并被稳定遗传的一类核酸分子，常见于细菌和真菌中。 2、蛋白质工程：是指应用基因工程的原理，结合蛋白质结晶学、计算机模拟设计和蛋白质化学等多学科的知识，通过蛋白质基因中某个碱基进行定向改变，从而改变蛋白质的氨基酸序列，是蛋白质的结构功能发生变化，产生符合人们所学的蛋白质或酶 3、回文结构：DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的具有二重旋转对称性的序列 4、限制性内切酶：原核生物中存在着一类能识别回文结构，并在此序列的某位点水解DNA双螺旋链，产生粘性末端或平末端，这类酶称为限制性内切酶 5、核酸分子杂交：是指基于适宜的温度及离子强度条件下，具有一定同源性的两条核酸单链可按碱基互补原则复性杂交形成双链，杂交的两条核酸单链分别是核酸探针和待测核酸 6、Southern印迹法:针对DNA分子进行的核酸分子杂交方法，该技术由英国科学家Southern首创，故因此而得名 二、问答： 1 写出限制性核酸内切酶常用反应体系和反应条件（15分） Tris-HCl 50mM pH7.5 MgCl2 10mM 0-50mM 低盐酶 NaCl 0-150mM 100 mM 中盐酶 DTT 1mM 150 mM 高盐酶 Vmlume 20-100μl TT 37℃ 1-1.5hr 2 试述什么是酶工程？（10分） 酶工程是指利用酶、细胞器或细胞所具有的特异催化功能，或对酶结构进行修饰改造，借助于生物反应器和工艺优化过程，有效地发挥酶的催化特性来生产人类所需产品的技术。 3 作为载体应具备哪些条件？（15分） 1． 具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性（可转移性） 2. 具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点 3． 具有较高的外源DNA的载装能力 4. 具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点 5. 具有合适的筛选标记 4 结合实例，试述细菌的限制与修饰作用。（15分） 在限制与修饰系统中，限制作用（restriction）是指一定类型的细菌可以通过其限制性内切核酸酶的作用，切割降解入侵的外源DNA（例如噬菌体DNA），使得外源DNA的入侵受到限制的现象；修饰作用（modification)是指在DNA甲基化酶作用下，生物体自身的DNA在特定碱基的特定位置上发生甲基化而得到修饰，从而免遭自身限制性内切核酸酶降解的现象。 5 质粒通常可以分为哪些种类？（15分） 高拷贝质粒 突变拷贝数控制基因 拷贝数1000-3000扩增基因 低拷贝质粒 来自pSC101 拷贝数小于10 表达某些毒性基因 温敏质粒 在不同温度下表现出拷贝数、整合等不同性质 测序质粒 含有测序通过引物互补序列和多酶接头polylinker 整合质粒 装有整合促进基因及位点 便于外源基因的整合 穿梭质粒 装有针对两种不同受体的复制子 便于基因克隆 表达质粒 装有强化外源基因表达的转录、翻译、纯化的元件 探针质粒 装有报告基因 便于启动子等元件的克隆筛选 1