肝衰竭机制及治疗进展_培训课件.pptVIP

方 法 采集骨髓 中山大学附属第三医院 方 法 分离MSCs（密度梯度离心法）： 得到单个核细胞，其中MSCs数量： 单个核细胞数量 × 10-3～ 10-4 个。 中山大学附属第三医院 方 法 介入途径回输 中山大学附属第三医院 方 法 B超途径回输 中山大学附属第三医院 对照研究 移植组32例，男30例，女2例，43.8±11.3岁。 对照组60例，男56例，女4例，44.2±11.3岁。 筛选标准： 1、重型肝炎患者，诊断依照：《2000年病毒性肝炎防治方案 》。 2、无其他肝脏疾病及慢性疾病或脏器功能障碍。 3、无严重并发症如严重感染、肝昏迷、肝肾综合征等。 4、半年内未进行抗病毒治疗和免疫调节治疗。 5、所有患者入院后均同时应用相同内科综合治疗一周：护肝治疗及新鲜血浆、白蛋白等对症支持处理。 6、均未行人工肝或肝移植治疗。 7、以MSCs自体移植术施行时间为观察起点。 中山大学附属第三医院 结 果 手术成功率100％。所有患者术中未出现严重不良反应及并发症。 术后出现穿刺部位局部血肿、瘀斑4例，骨穿部位与介入穿刺部位各2例，经对症治疗后均满意恢复。 术后未出现大量出血、感染、肝区疼痛不适等并发症。 中山大学附属第三医院 结 果 术后一到四周肝功能和凝血功能的平均改 善情况：移植组均优于对照组。 1、ALT改善情况：未见显著差异。 2、TBIL改善情况：术后三周起出现显著差异。 3、ALB改善情况：术后四周起出现显著差异 。 4、PTA改善情况：术后两周起出现显著差异。 中山大学附属第三医院 结 果 术后一到四周功能和凝血功能的平均改善情况对照 P=0.03 P=0.04 P=0.03 P=0.03 P=0.04 P=0.01 中山大学附属第三医院 结 果 术后一到四周肝功能和凝血功能改善患者的比例对照：移植组均优于对照组。 （其中由于慢性肝衰竭患者中ALT正常者较多，故选用ALT上升作为评价肝脏酶学改变的指标） 中山大学附属第三医院 结 果 术后一到四周ALT上升患者比例对照 中山大学附属第三医院 结 果 术后一到四周TBIL下降患者比例对照 中山大学附属第三医院 结 果 术后一到四周ALB上升患者比例对照 中山大学附属第三医院 结 果 术后一到四周PTA上升患者比例对照 中山大学附属第三医院 结 果 自觉症状改善情况（移植组优于对照组） 中山大学附属第三医院 结 果 （P=0.397） 出院时转归（移植组优于对照组） 中山大学附属第三医院 结 果 远期预后的比较（移植组优于对照组） 中山大学附属第三医院 结 果 在肝功能、凝血功能指标的改善方面，移植组的恢复均较对照组为好，但未见全部具有统计学意义的差异。 在自觉症状改善和出院转归以及远期预后等方面，移植组亦均优于对照组，但未见显著差异。 中山大学附属第三医院 结 论 部分患者的MSCs自体移植疗效欠佳： MSCs细胞数量较少 病情严重导致肝内框架破坏严重而损伤其分化微环境，导致移植的MSCs定植、分化障碍。 中山大学附属第三医院 目前存在问题 1. 体外标记、体内示踪。 2. 具体定植与分化过程。 3. 重建肝内微结构（小叶、胆管）。 4. 功能重建程度以及具体疗效评价方法。 5. 细胞数量：100 ～120ml骨髓中：107～108个单个核细胞（103 ～104个MSCs） 最好：107个MSCs数量级别。 6. 体外扩增培养：⑴时间问题；⑵生物安全性评估 中山大学附属第三医院 前 景 结果令人鼓舞，前景广阔。 着眼点： 1、疗效提高与评价 2、生物安全性评价 3、体外培养扩增或诱导分化后回输移植 4、基因改造后回输移植 5、其他干细胞的移植治疗 中山大学附属第三医院 谢 谢！ 中山大学附属第三医院 表1 患者人口学及治疗前基线情况(±S) 治疗组 对照组 例数 84 99 性别（男/女） 76/8 88/11 χ2＝0.123 P＝0.726 年龄（岁） 40.20±10.64 39.54±10.46 t=0.427 P=0.670 TBili(μmol/l) 386.18±183.48 403.11±180.09 t=0.628 P=0.531 AL