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空气凤梨组培快繁技术优化
空气凤梨组培快繁技术优化 摘要:以空气凤梨(Tillandsia ionantha)子株为外植体,研究了不同的消毒处理和培养基配方对生长的影响,优化了其组培快繁技术。结果表明,对空气凤梨子株适宜的消毒处理方法是75%乙醇4 s+0.1% HgCl2 6 min,外植体污染率低,仅为16.7%,且色泽嫩绿;诱导丛生芽适宜的培养基为MS+BA 5.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,增殖率达161.9%,丛生芽生长良好;利用壮苗培养基MS+ NAA(1.0~2.0 mg/L)进行培养,幼苗生长健壮
关键词:空气凤梨(Tillandsia ionantha);消毒;丛生芽诱导;组培快繁
中图分类号:Q949.71+8.16 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2017)04-0752-04
空气凤梨(Tillandsia ionantha)为凤梨科(Bromeliaceae)铁兰属(Tillandsia)多年生草本植物,包括近550个品种和90个变种。其形态特征和生长方式不同于普通植物,依靠叶片上的鳞片吸收空气中的水分和养分,尤其重要的是可在室内任意摆放、垂挂,既可作为室内装饰美化环境,又能够净化室内空气
国外关于空气凤梨的研究多集中在空气凤梨的分布、代谢以及作为空气污染指示植物等方面[1-4]。目前,国内对空气凤梨的研究尚处于起步阶段,仅有少量关于栽培管理技术和去除环境污染等方面的报道。王姗等[5]针对空气凤梨的开花性状进行了研究,发现K肥(120 mg/L)对成花率的影响显著,外源乙烯利具有明显的催花作用。丁久玲等[6,7]研究了肥料对空气凤梨的影响,表明氮肥为150~200 mg/L时有利于松萝凤梨生长。郑凯等[8,9]研究表明6-BA为促进空气凤梨分蘖的主要因素,14 d施肥1次有利于空气凤梨生长。李俊霖等[10]探讨了空气凤梨对甲醛的净化效果,表明松萝、硬叶空凤比吊兰更能快速有效地净化甲醛
空气凤梨繁殖主要依靠种子繁殖和分株繁殖,但这两种繁殖方式的繁殖速度均较为缓慢,限制了空气凤梨的推广应用。组培快繁技术可以加快繁殖速度,而空气凤梨的组培快繁技术报道在中国较为匮乏。本研究以空气凤梨子株为外植体,从外植体消毒、诱导丛生芽配方、壮苗配方等方面进行了研究,以期为空气凤梨快速繁殖提供技术支持,为其他种质的繁殖提供参考
1 材料与方法
1.1 供试材料
供试材料为2010年从美国引进的空气凤梨,选取生长一致的植株,将其基部的子株剥离作为外植体
1.2 方法
1.2.1 外植体消毒 选取高度为1 cm的空气凤梨子株置于三角瓶内,加入适量的洗涤剂反复振荡冲洗干净,用纯净水冲洗3次后移至超净工作台进行消毒处理。用无菌水冲洗3次,再用灭菌纸将外植体表面的水分吸干,接种在MS培养基上,每个消毒处理接种10瓶,每瓶接种3株。15 d后观察记录子株外观及污染情况。污染率=(污染的外植体数/接种外植体个数)×100%
1.2.2 丛生芽诱导 选择合适的消毒方法对空气凤梨子株消毒后,接入诱导丛生芽的培养基中。各培养基配方均在MS培养基基础上添加不同种类、不同浓度的植物生长调节剂。每个配方接种14瓶,每瓶接种3株。30 d后观察丛生芽诱导情况,记录增殖情况,增殖率=(增殖的芽数/原有的个体数)×100%
1.2.3 壮苗培养 选择合适的培养基诱导出丛生芽后,将丛生芽取出放入壮苗培养基中,继续生长。各培养基配方均是在MS培养基基础上添加不同种类、不同浓度的植物生长调节剂。每个配方接种6瓶,每瓶接种4个丛生芽。30 d后观察丛生芽生长情况
丛生芽诱导和壮苗培养的条件为培养基中含蔗糖3%,琼脂0.7%,pH 5.6~6.0;培养温度25~28 ℃,光照时间14 h/d,光照度2 000~2 500 lx
2 结果与分析
2.1 不同的消毒处理对空气凤梨外植体灭菌的影响
不同的消毒处理空气凤梨子株外观表现和污染情况见表1。其中,处理1、处理2、处理3和处理8污染严重,污染率分?e达93.3%、90.0%、83.3%和73.3%;其次是处理6,污染率为50%;处理4、处理5和处理7污染率较轻。虽然处理5和处理7的污染率低于处理4,但处理5和处理7的子株出现黑褐色或严重褐变,会对丛生芽诱导造成不良影响,而处理4的子株呈现淡绿色,无褐变现象,为丛生芽诱导提供良好的基础。对空气凤梨子株消毒要选择适宜的消毒液和消毒时间,本研究中适宜的消毒处理是75%乙醇4 s+0.1% HgCl2 6 min,外植体污染率低,且色泽为淡绿色
2.2 筛选丛生芽诱导的培养基
不同的培养基配方诱导出的丛生芽情况见表2。配方7的增殖率最高,达161.9%,诱导处理后无愈伤组织出现,诱导出
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