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　　三氧化二砷对人大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响论文 【关键词】 三氧化二砷 The Influence of Arsenic Trioxide on the Groerase Activity of Human Large Intestine Carcinoma Cells Abstract：Objective To study the influence of arsenic trioxide on the groerase activity of human large intestine carcinoma cell lines. Methods The influence of groan large intestine carcinoma cell lines LoVo and CoLo320 induced by As2O3 injection ethod, Trypan blue method, 3(4,5 dimethylthiazole2yl)2, 5diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay. Telomerase activity of the carcinoma cells easured by the method of repeat amplitication protocol (TRAP) bining ide gel electrophosis (PAGE) silver staining method before and after the treatment an large intestine carcinoma cell lines LoVo and CoLo320.Also the tolemerase activity of LoVo and CoLo320 treated by As2O3 injection edependent relationship. Conclusion As2O3 has significant inhibition effect on the human large intestine carcinoma cell lines, aybe closely related to As2O3 s inhibiting effect on the carcinoma cell tolemerase activity. Key a; Cell Lines; Arsenic Trioxide; Tolemerase 摘要：目的 探讨三氧化二砷（As2O3）注射液对人类大肠癌细胞生长及其端粒酶活性的影响。方法 采用活细胞观察法、台盘兰拒染法和四甲基偶氮唑蓝比色（MTT）法，严密观察As2O3注射液对人大肠癌细胞株LoVo和CoLo320生长的影响；应用端粒重复序列扩增法（TRAP）—聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）银染法检测As2O3注射液处理前、后大肠癌细胞端粒酶活性的变化。结果 As2O3注射液能够显著地抑制LoVo和CoLo320细胞株的生长，并对癌细胞的端粒酶活性具有明显的抑制作用，该作用呈现出一定的浓度和时间依赖性。结论 As2O3注射液的确对于人大肠癌细胞株的生长具有显著的抑制作用，该作用可能与As2O3注射液能够抑制癌细胞的端粒酶活性密切相关。 关键词：大肠癌；三氧化二砷；细胞株；端粒酶 0 引言 三氧化二砷（As2O3）是剧毒中药砒霜的有效成分,自 20世纪70年代以来，我国学者率先研制成功As2O3注射液，用于治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)，取得了世人瞩目的突破进展15。近年来.freela公司,TaqDNA多聚酶购于Promega公司。聚丙烯酰胺为EMERCK公司产品。 1.3 细胞培养 将LoVo和CoLo320细胞株接种于无菌培养瓶中，加入含小牛血清、青链霉素的培养液，于培养箱中培养，细胞呈单层贴壁生长，每3～4d传代一次。 1.4 活细胞观察 在培养状态下,在倒置显微镜下观察细胞用药前后生长状况及其形态学改变。 1.5 台盘兰拒染法检测细胞增殖率 癌细胞悬液以2×107/L浓度接种于40孔细胞培养板中，待细胞贴壁后分别加入不同浓度的As2O3注射液,对照孔加培养液,.freelin,显微镜下计算出拒染的活细胞数,按下式计算细胞增殖率:细胞增殖率=(给药组平均活细胞数/ 对照组平均活细胞数)×100% 1.6 MTT法检测细胞增殖率 将浓度为2×107/L癌细胞接种于40孔细胞培养板中，待细胞贴壁后分别加入不同浓度的As2O3注射液,对照孔加培养液,培养至预定时间，每孔加入MTT,继续培养4h,加盐酸异丙醇