指纹图谱实验研究技术指南(试行).docVIP

中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南（试行） 说明：本实验研究规程指南为在原技术要求的基础上规范中药注射剂色谱指纹图谱试验研究而制订。本指南未能概括的内容，色谱指纹图谱指采用柱色谱及薄层色谱等各种色谱技术实验研究的指纹图谱。光谱指纹图谱将另行规定。 供试品收集 供试品收集是研究指纹图谱最初也是最关键的步骤，由于不可能对一个药材的所有样本进行试验，而且生长环境条件对药材代谢产物有影响，所以要收集有代表性的供试品。收集不少于10批供试品的含义是指样本的数和量要有足够的代表性。 （一） 药材的批 批，是指相互独立的供试品，即不能将同一地点或同一渠道同一时间获得的供试品分成若干份供试品，以保证试验结果的代表性。由于收集药材供试品受主观和客观的条件限制，供试验的供试品严格讲均没有统计学的意义，所以供试品数越多越好，10批是最低的要求。供试品应保证其真实性，应有完整采样原始记录，内容包括: 供试品来源（真实记录供试品来自何处：传统产地收集或是资源丰富的产地收集，或者来自GAP基地供应；还是产地购买、市场购买或委托购买，等，以便于生产原料的采购选择和测试数据的可追溯）。 货源情况调查（货源是否充足和稳定） 基原鉴定及鉴定人：产地或GAP基地收集的药材结合植物形态鉴定品种。如缺原植物，由熟练的专业人员凭性状或显微特征鉴别。如近缘品种、难以区分的野生品种（如白花蛇舌草、蒲公英），应在指纹图谱研究中仔细比较，如获得的指纹图谱相似度很高，也可应用，但须明确记录。并在今后实施GAP时确定一个品种，如指纹图谱相似度很低，则须确定品种，改为栽培品使用。商品混乱的品种（如陈皮）产区的选择应缩小范围，并结合资源选用药典收载品种中的一种。复方制剂中的君药及处方量大的药材必需重点注意品种的鉴定，以避免今后执行指纹图谱过程中出现难以预料的困难。 供试品的留样、贮藏和标签：由于指纹图谱研究周期较长，供试品必须在干燥、低温、避光处贮藏，标签必须有编号，收集供试品的编号应与贮藏样品、试验样品的编号一致。留样数量应不少于试验实际用量的3倍。以保证试验结果有异议时的可追溯。申报资料可将关键内容扼要填写于表一中： 药材名称 供试品编号 供试品来源 收集时间（购买时间）及收集人 货源情况调查 基原鉴定及鉴定人 学名： 鉴定人： 质量评估 供试品留样 数量：容器：贮藏地点及条件 标签 原始记录保存处 1，药材外形照片2，药材的色谱图（试验完毕后）：（二） 半成品（提取物）名称混批前批号日期提取方法（关键技术）混批后批号混批比例原始记录保存处供试品留样数量：容器：贮藏地点及条件附：混批前後的指纹图谱。（三） 物）批号的相关性均须有明确的记录，以保证试验数据的可追溯。成品的对照用指纹图谱是建立在标准化提取物或10批以上产品指纹图谱的基础上。各批供试样品须有留样。主要内容填写于表三，并附试验完毕后的指纹图谱。供试品批号生产单位供试品数量供试品留样数量：容器：贮藏地点及条件指纹图谱研究用的原药材、半成品及注射剂成品均应有10批以上的样品供实验，以保证指纹图谱的可重复性。 （一） 药材供试品溶液的制备 0.5~1Kg，分别称量茎、叶、花、果的大致比例并做记录。例如果实类药材，生产时去除种子的，供试品也应除去种子，并做记录。如果药材表观质量不均匀（如大小不一、肥瘦不等、粗细不匀等），应注意供试品的取样有代表性，其后的试验中，必要时应做比较试验，以考察所含成分有无显著差异，供生产参考。 1：10，即如称取1g供试品，应在混合均匀的10g 3位有效数字。 定容：供试品溶液最终应用适宜的溶剂溶于标定容量的容器中，制成标示浓度的供试品溶液（g/mL或mg/mL）。 48小时。 主要操作过程及数据应详细记录。（二）半成品（提取物）供试品溶液的制备称取不同批次的半成品（提取物），参照供试品溶液的制备方法中相应的内容制备成一定量的溶液，备用。标签须注明编号或批号，应与取样的药材编号一致，或有明确的关联，以保证数据的可追溯。主要操作过程及数据应详细记录。（三）成品（注射剂）供试品溶液制备液体注射剂一般可直接或稀释后作为供试品溶液，必要时也可用适宜的溶剂提取并制备成一定量的溶液。固体形式的注射剂（冻干粉针）须注意注射剂成品的附加剂有无对色谱试验干扰。如有干扰，须研究采取适宜的样品预处理方法以排除干扰（如含有氯化钠则液相色谱不可使用蒸发光散射检测器；如糖分太多，可能影响薄层色谱的清晰度和分离度；冻干粉针的骨架剂用量较大时也可能影响色谱的质量等）。此外，单方注射剂药材或复方注射剂中不同药材成分类别如果相差较大，色谱条件要求不同，需要进行样品的预处理时，应分别进行试验，便于制备2张以上的指纹图谱。主要步骤及数据应详细记录。三、参照物（一）参照物的选择：指纹图谱的参照物质一