【2017年整理】脓汁与和粪便标本中病原菌的检测1.ppt

医学微生物学实验;医学微生物学实验;微生物学实验室规则;实验分组;实验室器材 整齐有序;常用器材摆放顺序： 电源插座→试管架→酒精灯→污物盘。 试管架上器材： 按接种针、接种环、油性笔和打火机的顺序，分别放置在试管架中间两行，靠近电源插座一侧。 ※器材使用以后，必须放回原处，依次摆整齐。;普通冰箱(3颗星***) 冷藏室(上柜）： 温度4～8℃，保存培养基、细菌培养物、常用菌种和抗菌素纸片等。 冷冻室（下柜）： 温度－18℃，保存诊断血清、血浆，长期保藏的菌种和抗菌素纸片。 ;隔水式电热恒温培养箱：35～37℃， 一般细菌培养时间为18～24小时。 ;奥林巴斯 CX21型 生物显微镜 （实验柜内，每人一台）; 1500W电炉▲安全警告 培养基沸腾溢出→流入电炉： ①触电→危及生命！ ②短路→断电，③…。;蒸馏水：配制培养基。 1‰新洁而灭：怀疑病原菌污染，泡手3～5分钟。 消毒液：擦拭实验台台面。 玻片缸：浸泡用过的载玻片。;医学微生物学实验综合性实验一 ;常见病原性球菌的检查程序P47： 直接涂片、革兰染色、镜检 脓汁、痰、咽部分泌物 观察菌落性状、溶血性、色素 血琼脂平板培养 涂片染色镜检 挑取可疑菌落 生化反应 ↑ 纯培养 动物实验 药敏实验 血液、穿刺液 → 肉汤增菌培养 → 培养液涂片染色境检 常见肠道致病菌的检查程序P48： 粪便 → SS琼脂、伊红美蓝平板培养 → 挑取可疑菌落 ↑ ↓ 血清学鉴定 血、骨髓 → 增菌培养 双糖铁培养基 染色镜检 生化反应 ;从培养基的制备，细菌的分离、纯化、形态学检查，到细菌的生化试验、血清学试验和药敏试验，全都由同学们亲自动手操作和完成。 综合性实验是一个连续的过程，一个步骤，一个环节的失误，将直接影响到最终实验结果。 实验时应严格按要求操作，实验结果要及时观察，及时记录，以便撰写实验论文。;培养基的制备; 1500W电炉▲安全警告 培养基沸腾溢出→流入电炉： ①触电→危及生命！ ②短路→断电。;分装;量筒;边台抽屉内器材： 试管（棉塞），刻度吸管，洗耳球，称量纸，药勺，硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋,尺子。 药勺、吸管用后洗净、甩干，放回原处。; 称量纸置于左盘，游码移至标尺左端“0”点位置上，指针应对准中线，取得平衡。否则将杠杆两端的调整螺母旋动调节平衡。;培养基制备;;培养基;培养基的种类（按物理性状分类） 液体培养基:不含凝固剂（琼脂），用于增菌，纯培养,保种。 固体培养基:含1％～2％琼脂，用于分离培养,纯培养,保种。 半固体培基:含0.3％～0.5％琼脂，用于动力检测,保种。;培养基的种类（按用途分类）P3 基础培养基:含一般细菌生长繁殖所需的基本营养成分，可作为一些特殊培养基的基础成分，如普通平板。 营养培养基：在基础培养基中加入血液、生长因子等特殊成分，供营养要求较高的细菌和须要特殊生长因子的细菌生长，如血平板。 增菌培养基：促进目的菌的生长，适用于含菌量较少的标本，如葡萄糖肉汤。 选择培养基：在培养基中加入抑制剂抑制杂菌生长，有助于目的菌的生长，如EMB、SS平板。 鉴别培养基：利用细菌分解能力及代谢产物的不同，在培养基中加入特定的作用底物和指示剂，用来试验细菌的生化反应、代谢产物，如糖发酵管。 厌氧培养基：氧化还原电势低，表面用凡士林、石蜡封住，与空气隔绝，成为无氧环境，如庖肉培养基。;培养基的灭菌;; 培养基灭菌以后，趁热斜放，培基不超过试管长度的2/3，琼脂凝固以后形成一个倾斜的表面。 斜面主要用于纯菌移种和菌种保存。 斜面底部的冷凝水有利于纯菌移种、菌苔形成和菌种保藏。;怎样检查培养基是否合格?;卧式圆形压力蒸汽灭菌器;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2