溴氰菊酯对罗非鱼血清中溶菌酶质量浓度及肝脾脏影响.docVIP

溴氰菊酯对罗非鱼血清中溶菌酶质量浓度及肝脾脏影响 陈家长1,2，冷春梅2，胡庚东1，瞿建宏1 1. 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心//中国水产科学研究院内陆渔业生态环境和资源重点开放实验室，江苏 无锡 214081； 2. 南京农业大学无锡渔业学院，江苏 无锡 214081 随着溴氰菊酯在农业上的广泛应用，其在水环境中的污染机率也在增加。为了研究溴氰菊酯连续暴露对罗非鱼免疫系统的影响。通过测定血清中溶菌酶质量分数，观察罗非鱼（tilapia）肝脾脏的外观变化，以及计算肝脏和脾脏的脏器系数，评价溴氰菊酯连续染毒对罗非鱼的影响。实验设1.0，2.0，3.0，5.0，10.0 μg/L 5个质量浓度组和空白对照组，同时每组设置一个平行样。试验开始后的第3天，1.0 ~5.0 μg/L质量浓度组的罗非鱼血清中的溶菌酶质量浓度接近或略小于对照组，10.0 μg/L质量浓度组与对照组相比下降明显（P0.05），降幅达49.3% 。实验7~15 d期间，1.0 ~5.0 μg/L质量浓度组罗非鱼血清的溶菌酶质量浓度渐渐升高，高于正常鱼体的质量浓度，最高值可达138.06±2.2 μg/mL，为对照组的220.9%（P0.05）。10.0 μg/L试验组罗非鱼血清中溶菌酶的质量浓度在试验第7天时降至最低，为26.5±1.9 μg/mL，为对照组的42.4%，表现出明显的抑制作用（P0.01）。随着暴露时间的延长，各试验组在20 d时恢复至正常水平，血清中溶菌酶的质量浓度与对照组相比没有明显差异（P0.05）；溴氰菊酯染毒第25天时罗非鱼的肝脏和脾脏的脏器系数与对照组相比均未发生明显的差异， 罗非鱼的脾脏外观没有发生异常，但肝脏却发生了明显的病变，试验第25d时10.0 μg/L质量浓度组罗非鱼肝脏的异常率达66.67%。试验结果表明，溴氰菊酯对罗非鱼血清中溶菌酶的影响是可逆的，对肝脏会造成一定的病理损伤，对脾脏的影响未检出。 溴氰菊酯；罗非鱼；溶菌酶；脏器系数中图分类号：X 文献标识码：A 文章编号：1672-2175（2007）0-0785-05溶菌酶是一种水解酶，存在于鱼类粘液、血清和巨噬细胞中[1]。水产动物体内的溶菌酶是一种重要的非特异性防御因子,是鱼类生理防御水平的一个重要标志,可以体现病原菌及其它环境因素对鱼体健康的影响[2]。脾脏是鱼体重要的免疫器官之一，含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，能吞噬和清除衰老的红细胞、细菌和异物，是机体细胞免疫和体液免疫的中心[3]。肝脏内有一种具吞噬功能的细胞，能吞噬细菌和消除血液中的异物，是机体防御系统主要组成部分，同时肝脏也是机体主要的解毒器官，无论是外来的还是自身代谢产生的有毒物质，都会首先在肝脏中储存起来，，然后通过肝脏的解毒处理，使之成为无毒物质或溶解度较大的物质，随胆汁或尿液排出体外[4]。因此某些有毒污染物可造成肝脏的损伤。 溴氰菊酯（Deltamethrin，DM）又名敌杀死，是拟除虫菊酯中杀虫活性最大的一个品种[5]。因其具有较高的生物活性，自1974年开发生产以来在世界范围内应用广泛，在中国也是用量增长最快的农药之一[6]。近年来，有关溴氰菊酯毒理方面的研究和评价已有大量的文献报道，但主要集中在对高等动物和鱼类等水生生物的急性毒性、亚急性毒性方面[7-12]，对长时间低剂量接触溴氰菊酯后水生生物（尤其是鱼类）体内的生化和免疫毒性效应研究不多。因此本试验通过对溴氰菊酯连续暴露后罗非鱼(tilapia)血清中溶菌酶质量浓度的测定，，以及肝脾脏的脏器系数和外观形态变化的分析，探讨了低质量浓度溴氰菊酯连续暴露对罗非鱼免疫生化指标的影响，为进一步研究溴氰菊酯对鱼类的中毒机制打下基础。 w=2.5%溴氰菊酯乳油［拜耳（中国）有限公司］；溶菌酶（LZM）测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所，其它试剂均为分析纯。 试验所用罗非鱼(Tilipia)为奥利亚罗非鱼（Oreochromis aurea），由淡水渔业研究中心试验场提供。平均体长为13.0±1.0 cm，平均体质量为70.0±5.0 g。试验前驯养10 d以上，自然死亡率低于1%，选择体质健康，规格一致的个体作为试验用鱼。试验用水族箱为45 cm×45 cm×65 cm玻璃水箱，水箱有效体积为80 L，载鱼量为30尾。 试验用水为曝气3d后除氯的自来水，pH值为7.04~7.25，总硬度8.04~8.25 德国度。水中含Zn 0.02 mg/L，Fe 0.05 mg/L，Pb、Cu和Cd未检出，COD2.15~2.38 mg/L，试验期间不间断充氧，水中溶氧量保持在5 mg/L以上，试验水温保持在25±1 ℃。 电热恒温水浴锅（上海医疗器械厂），Sigma 2-16K高速离心机，721型分光光度计（上海第三