苏州大学《分析化学 》第10章 吸光光度法.pptVIP

第10章 吸光光度法 10.1 概述 10.2 吸光光度法基本原理 10.3 分光光度计 10.4 显色反应及影响因素 10.5 光度分析法的设计 10.6 吸光光度法的误差 10.7 常用的吸光光度法 10.8 吸光光度法的应用 10.1 概述 吸收光谱 发射光谱 散射光谱 10.2 吸光光度法基本原理 1 吸收光谱产生的原因 光:一种电磁波,波粒二象性 吸收光谱曲线：物质在不同波长下吸收光的强度大小 A～l关系 最大吸收波长 lmax：光吸收最大处的波长 4 朗伯-比尔定律 灵敏度表示方法 摩尔吸光系数 e 吸光度的加和性 1 分光光度计的组成 常用光源 单色器 作用:产生单色光 常用的单色器：棱镜和光栅 检测器 作用：接收透射光，并将光信号转化为电信号 常用检测器： 光电管 光电倍增管 光二极管阵列 要求： a. 选择性好 b. 灵敏度高 (ε104) c. 产物的化学组成稳定 d. 化学性质稳定 e. 反应和产物有明显的颜色差别 (?l60nm) 1 测定波长选择 选择原则：“吸收最大，干扰最小” 灵敏度 选择性 2 测定浓度控制 控制浓度 吸光度A：0.2～0.8 减少测量误差 3 参比溶液选择 仪器调零 消除吸收池壁和溶液对入射光的反射 扣除干扰 试剂空白 试样空白 褪色空白 4 标准曲线制作 理论基础：朗伯-比尔定律 相同条件下 测定不同浓度标准溶液的吸光度A A～c 作图 10.6 吸光光度法的误差 非单色光引起的偏移 物理化学因素：非均匀介质及化学反应 吸光度测量的误差 对朗伯-比尔定律的偏移 1 非单色光引起的偏移 复合光由l1和l2组成，对于浓度不同的溶液a和b,引起的吸光度的偏差不一样，浓度大，复合光引起的误差大，故在高浓度时线性关系向下弯曲。 非均匀介质 胶体，悬浮、乳浊等对光产生散射，使实测吸光度增加，导致线性关系上弯 2 物理化学因素 离解、缔合、异构等 如：Cr2O72-+H2O-=2HCrO4-=2H++2CrO42- PAR的偶氮－醌腙式 化学反应 吸光度标尺刻度不均匀 3 吸光度测量的误差 A＝0.434 ，T＝36. 8% 时，测量的相对误差最小 A=0.2~0.8, T=15~65%，相对误差4% dc/c= dA/A=dT/TlnT Er=dc/c×100％= dA/A×100％=dT/TlnT×100％ 令ST=0.01,计算T不同值时的Sc/c，当TlnT对T进行微分时，其值为零时，Sc/c最小，此时T=0.368。 1.示差吸光光度法 目的：提高光度分析的准确度和精密度 解决高(低)浓度组分(i.e. A在0.2~0.8以外)问题 分类：高吸光度差示法、低吸光度差示法、 精密差示吸光度法 特点： 以标准溶液作空白 原理： A相对 = ?A = ?bcx- ?bc0= ?b? c 准确度：读数标尺扩展, 相对误差减少, c0愈接近cx, 准确度提高愈显著 10.7 常用的吸光光度法 例：硫脲还原－硫氰酸盐比色法测定钢铁中的钼。酸溶，硫酸－高氯酸介质中，硫脲还原铁（III）为铁(II),除干扰，还原钼（VI）为五价，2.00mg/100ml的钼标准溶液为参比溶液，用2.00-2.30mg/100ml的钼标准溶液，绘制工作曲线和测定样品溶液的吸光度,480nm测定A。 2.双波长吸光光度法 目的：解决浑浊样品光度分析 消除背景吸收的干扰 多组分同时检测 原理： ? A = Al1-Al2 = （?l1- ?l2）b c 波长对的选择： a.等吸光度点法，b.系数倍率法 3.导数吸光光度法 选l1为参比波长, l2为测量波长 得 Al1= ? xl1bcx + ? yl1bcy Al2= ? xl2bcx+ ? yl2bcy ΔA=Al2-Al1= (? xλ2bcx+? yl2bcy)-(? xl1bcx+? yl1bcy) 在等吸光度的位置(G, F), ? yl2＝ ? yl1，则上式成为 ΔA=(? xl2- ? xl1）bcx ΔA与cx成正比, 可用于测定 例,苯酚与2,4,