HPLC法测定参桂调经丸中丹皮酚的含量论文.docVIP

　　HPLC法测定参桂调经丸中丹皮酚的含量论文 .freelm×4.0 mm,5 μm),以甲醇-水(70∶30)为流动相；检测波长为274 nm,流速为1.0 mL/min。结果 线性范围为0.052～0.84 μg(r＝0.999 9),平均回收率为99.94%(RSD＝1.63%)。结论 本法简便、灵敏、准确,可用于该制剂的质量控制。 【关键词】 参桂调经丸；丹皮酚；高效液相色谱法 Abstract：Objective To establish a method of HPLC for determining the Paeonol in Shengui Tiaojing Pill. Method Agilent Hypersil-ODS-C18 (250 mm×4.0 mm, 5 μm) obile phase consisted of methanol-H2O (70∶30). The floL/min. The detecting . Results The method ethod is simple, sensitive, accurate and can be applied to the quality control of Paeonol in Shengui Tiaojing Pill. Key m×4.0 mm, 5 μm)；以甲醇-水(70∶30)为流动相,流速为1.0 mL/min；温度：室温；检测波长：274 nm。理论塔板数按丹皮酚峰计算不少于3 500。 3 方法与结果 3.1 溶液的制备 3.1.1 对照品溶液的制备 精密称取丹皮酚对照品适量,加甲醇制成每1 mL含15 μg的溶液。 3.1.2 供试品溶液的制备 取重量差异下的本品,剪碎,混匀,取1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精加70%甲醇50 mL,密塞,称定重量,超声处理(功率250 in,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足失重,摇匀,滤过,取续滤液,即得。 3.1.3 阴性对照溶液的制备 按处方比例及工艺, 制备不含牡丹皮的阴性对照样品,并按供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液。按上述色谱条件,将上述3种溶液各进样10 μL,采集色谱图,阴性样品在丹皮酚峰位置无干扰峰。结果见图1。 3.2 线性关系考察 精密称取丹皮酚对照品约5 mg置50 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,再分别精密吸取0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mL置10 mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,各进样10 μL,照上述色谱条件测定峰面积。以进样量(μg)对峰面积积分值进行线性回归,得回归方程：Y＝9 855.792＋2 066 694X,r＝0.999 9,线性范围为0.052～0.84 μg。 3.3 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液l0 μL,按上述色谱条件重复进样6次,丹皮酚峰面积积分值RSD＝0.87%。 3.4 稳定性试验 取同一份供试品溶液(批号0405002),按上述色谱条件,分别每隔1 h进样,丹皮酚峰面积在12 h内性质稳定,RSD＝0.70%。 3.5 重现性试验 取同一批供试品(批号0405002)6份,照供试品溶液制备方法制备,依法测定含量,结果RSD＝1.00%。 3.6 加样回收率试验 采用加样回收法,取已知含量的供试品(批号0405002)9份,每份1 g,精密称定,其中3份分别精密加入0.445 0 μg/mL丹皮酚对照品溶液0.5 mL,3份分别精密加入1 mL,另3份分别精密加入2 mL,混匀,其余按供试品溶液制备方法制备供试液,依法测定,计算回收率。结果见表1。表1 回收率试验结果（略） 3.7 样品测定 取不同批号的样品,按供试品溶液的制备方法制备,分别取供试品溶液及对照品溶液注入液相色谱仪,各进样10 μL,用外标法计算丹皮酚含量。5批样品含量测定结果见表2。表2 参桂调经丸中丹皮酚含量测定结果(略) 4 讨论 来用流动相配制的对照品溶液,测定其紫外吸收光谱,丹皮酚的最大吸收波长为274 nm,故确定以此为HPLC的检测波长。 根据丹皮酚的溶解性,选用甲醇、50%甲醇、70%甲醇为提取溶媒,提取方法选择超声处理,结果70%甲醇为提取溶媒提取效果最理想。超声时间选用25、30、35、40 min,结果35 min提取已完全。 本试验建立的方法简便,专属性及重现性好,结果准确可靠,可用于该制剂的质量控制和分析。 【